一、影响ELISA的因素

1.  试验的重复性（精确度）

有二种方法来检验试验的精确度：通常用变异系数来表示：1、几个样品用ELISA法同时进行多次测定求出CV%；2、不同时间对不同操作者对某几个样进行多次测定求出变异系数。CV是个体参数标准差与平均数的比率。

S / X ＝ CV ，CV应低10%，不应大于10～15%。

不论目测或分光光度计测定，均可作一个稀释度或一系列稀释度测定，一般常规诊断只用一个稀释度判断阳性或阴性就可以了，这样比较方便，现在推荐传染病的血清诊断用1：200一个稀释度。有些需要精确定量的，可作一系列稀释度测定。

记录结果有下列几种方法：

1、“+”或“-”：所有超过规定的OD值（如OD，0.4）的标本均属阳性，此规定OD值是根据事先测定大量阴性标本所取得的，此规定值是阴性标本的上限。或者以一组阴性标本OD平均值加2～3个标准差作为阳性阈值。

2、直接以OD值来表示，如0.4、0.7、1.2，OD值越大，阳性反应越强，但此数值是在固定实验条件下得到的结果，而且每次实验都要有参考标本作对照。

3、以终点滴度表示：将标本作连续稀释，最高稀释度能出现阳性反应者（即OD值仍大于阳性阈值，即为该标本的滴度。

4、以“比值表示：求出被检标本的OD值与一组阴性标本OD值的比值，例如为阴性标本的2倍或3倍，即为阳性，比值小于2.1而大于1.5为可疑，2.0时，应作适当稀释后再作测定。

2.  对使用仪器要求

所用仪器如吸管、烧杯试管都要清洁，用于酶结合和底物的吸管和容器一定要分开。试剂要求标准化。