实验动物中最主要的模式动物小鼠，在科研和应用性研究中大量使用， 动物实验中，给予动物受试物后，我们除了观察其外观和表征，可能还需要采集动物的血液或体液等进行检测，以便进一步观察动物的生理、生化指标的变化。

因此，采血是动物实验中最常用的操作技术之一，本文主要对几种常用的小鼠采血方式进行介绍，以指导实验人员合理进行采血，尽可能的保障小鼠动物福利，以期能够在最小的动物伤害下，获得高质量的血液样本，提高实验效率。

常用采血方式

01、鼠尾采血

适用于少量多次采血。

· 用无菌手术刀或锋利的剪刀，快速截取小鼠尾尖。

· 一般可采集血量为0.1-0.2 mL，所采集血液为动静脉混合血。

· 采血结束后使用无菌棉球按压伤口处止血。

从动物福利角度出发鼠尾采血应优先选择用于需血量较少的连续多次采血，如血常规或血糖的动态监测等。

02、眼眶后静脉丛取血

采血量一般为 0.2-0.3 mL，适于多次重复采血。

· 取血前，将麻醉药物滴入采血侧眼球，对小鼠眼部进行局部麻醉。

· 用左手拇指及食指压迫小鼠颈部两侧，阻碍静脉回流，使眼球充分外突，眼眶后静脉丛充血。

· 右手持硬质毛细玻璃管，沿眼角刺入眼眶底部，轻轻捻动毛细管，使其刺入眼眶静脉丛，可见血液流出。

· 采集到所需血量后，除去加于颈部的压力，同时拔出毛细管，用无菌干棉球按压止血。

03、隐静脉采血

常用于少量血液采集，隐静脉采血无需麻醉，待动物固定后剃毛暴露采血点，采血针刺入采血点，即可获得血液样本。采血结束后使用无菌干棉球压迫止血。

04、颌下静脉采血

主要适用于成年小鼠，一般可采集血量约0.2-0.5 mL，面部采血一般无需麻醉，待动物固定，确定采血点后使用采血针迅速刺入，获得血液样本。得到所需血量后，用无菌干棉球压迫止血。

05、心脏采血

适用于需血量大的实验终末期的动物采血，可采集血量0.5-1 mL，此方法需在麻醉状态下进行。

· 将小鼠胸腔部凸出、展平，左手轻轻捏住小鼠腹部皮肤，作为着力点。

· 右手持1 mL注射器，针尖斜面朝上，与腹部约呈10-20°夹角，从剑突与左肋弓的交界处刺入，此时可见血液流入注射器。

· 见血后保持注射器位置不动，匀速向后抽注射器，保持针芯与血液平面大约0.1 mL距离，即有一定的负压，直至采血结束，拔出注射器。

06、腹主动脉采血

适用实验终末期采血，可采集血量 0.8-1.2 mL。动物麻醉后，解剖暴露腹主动脉的方式采集血液，取血量大、不易溶血，适用于多项目检测，不损伤器官，不会出现因操作不当造成气栓与瘀血等，有利于病理组织学检查。

总结

小鼠的循环血容量一般约为 55-70 mL / kg，动物的采血量一般与被采血动物的体重、采血频率以及采血前是否给予补液有关系，且同种动物不同采血位点的采血量一般也不相同。

表1、小鼠循环血容量及采血量

表2、不同采血量对应恢复时间

注意：长期多次采血每24h不应超过总血量的1％(0.6 mL/kg/d)。采集次数和（或）采血量过多则引起贫血。

实验中应考虑不同的采血方法对动物福利的影响，在满足“3R”原则的同时，应根据实验所需采血量选择合适的采血方法。熟练的掌握各种采血方法的操作技能，从而获得良好的实验数据，最大程度的降低对实验结果的影响。

参考资料：

[1]Alix et. al., (2018). Murine Pharmacokinetic Studies, Bio-protocol 8 (20): e3056. DOI: 10.21769/BioProtoc.3056.