【IACUC】实验动物镇静、止痛、麻醉和安乐死指南 |
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发布时间：2018-03-21 发布单位： 1目的：规范实验动物镇静剂、麻醉剂和止痛剂的使用。以及实验动物安乐死方法，确保人道的处理动物。 2范围：根据AAALAC要求，参考Laboratory Animal Anaesthesia 和AVMA Guidelines on Euthanasia推荐的动物安乐死方法制定本使用指南，为各院系PI撰写研究计划提供正确合理的镇静、麻醉和安乐死选择药物和方法。 对于给药方式说明：IP----腹腔注射 SC----皮下注射 IM----肌肉注射 IV----静脉注射 PO----口服 3设备与材料：CO2气瓶；配带盖和各种动物品种大小的麻醉诱导箱；麻醉机；注射剂或吸入剂；适当规格的注射器和针；个人防护装备至少包括防护服、手套、帽子和口罩等 4．步骤： 4.1 麻醉规程 麻醉时应认真检查所用的麻醉/止痛剂的有效使用日期，不可以使用过期的药物。 从开始麻醉到动物清醒必须对动物进行实时监护。麻醉的动物会反应迟钝、无方向感，所以麻醉时应将动物放置笼中或采取适当的措施防止动物造成损伤。动物完全麻醉（完全失去意识）方可开始手术。 麻醉期间应注意对动物采取适当的保温措施，如电热毯或红外线加热灯，防止动物体温降低。 4.2对麻醉程度的检测 如果动物有翻身反应或对疼痛和刺激发生反应，如表现蠕动、移动、收回肢体，则手术必须延迟进行。 深度疼痛测试，用手指挤压动物的后肢脚趾，如果动物有反应如缩回后肢，则动物意识未完全消失；如果动物对测试无反应，则为无意识或意识消失，麻醉达到手术要，可以开始手术。 外科手术开始时，动物应充分松弛、对疼痛刺激无反应、呼吸和心率正常。 4.3 设施 在动物房或手术室实施麻醉。但麻醉时应尽量不要在其它动物听到、看见和闻到的区域进行。 4.4局部麻醉 局麻是在小的非创伤性手术时，减轻动物痛苦而采取的措施。局麻的选择将取决于手术所需时间的长短、场所和动物品种。常用的局麻药有盐酸利多卡因和盐酸普鲁卡因。 4.5剂量计算 根据动物的体重，计算麻醉药合适的给药剂量。 例如，用氯胺酮+安定麻醉300g的大鼠 氯胺酮的剂量是75mg/kg，安定是5mg/kg 因此，0.300kg×75mg/kg=22.5mg氯胺酮 0.300kg×5mg/kg=1.5mg安定 4.6 根据动物品种选择麻醉药物、剂量和给药途径 吸入麻醉剂（如异丙烷）所有品种的动物均适用。钢瓶中压缩CO2气体与氧气（50:50）混合至100%的CO2可以用于啮齿类动物短期吸入麻醉剂。 4.7.1 CO2麻醉 CO2诱导短暂的失去意识并适用于某些实验过程，如眼眶后静脉丛采血和一些注射。每次只麻醉一只动物。 使用一个与氧气未混合的CO2相连的容器。打开气瓶的主要阀门，通过微调从而调整气体压力。把动物放进气体流动的容器并关上容器盖子。离开动物1-3/2分钟直到动物呼吸缓慢和无意识，从容器中取出动物开始实验。动物将维持20-30秒无意识状态。如果需要再麻醉20秒，追加一次麻醉剂量，不可以连续超过2次追加CO2麻醉。动物在容器中不可以放置超过5/2分钟。 动物将完全恢复，动物一恢复意识就放回原笼中。 在动物放进容器前，通过往眼里滴一滴盐酸丙对卡因更有宜于眼眶后静脉丛采血。局麻可以使动物减少对操作的敏感性并延长动物失去意识的时间，动物大约10秒钟就失去意识。先于采血前眼睛用薄纸擦拭以除去残余的盐酸丙对卡因。 4.7.2 常用的镇静、麻醉、止痛和安乐死推荐药物和方法 4.7.2.1小鼠的镇静、麻醉、止痛和安乐死推荐药物和方法 4.7.2.1.1 小鼠镇静剂和诱导麻醉药物的选择 术前诱导麻醉药物 剂量 给药方式 效果 阿托品 0.04 mg/kg SC or IP 抗胆碱能作用；减少唾液，呼吸道分泌物，阻止血管迷走神经反射 安定 5 mg/kg IP 轻微镇静作用；不能止痛 氟胺酮 0.1-0.3 ml/kg IP 轻度镇静，中度止痛； 氯胺酮 100-200 mg/kg IM 深度镇静，轻微止痛；缺乏肌肉松弛作用4.7.2.1.2 小鼠麻醉药物的选择 注射用麻醉剂 剂量 给药方式 麻醉深度(轻度/外科麻醉) 持续时间(min) 恢复时间(min) 氯胺酮﹠安定 100mg/kg﹠5mg/kg IP 保定/麻醉 20-30 60-120 丙泊酚 26mg/kg IV 外科麻醉 5-10 10-15 氟胺铜﹠安定 0.4ml/kg&5mg/kg IP or IP 外科麻醉 20-40 120-240 丙泊酚 26mg/kg(然后2-2.5mg/kg/min) IV 外科麻醉 1-12hours 10-15 异氟烷 0.41ml/min at 4L/min Fresh gas flow (使用浓度2%) 吸入 外科麻醉 -- -- 三溴乙醇（阿弗丁) 125-240 mg/kg(使用浓度0.25%) IP 外科麻醉 15-45 60-120注： 100%阿佛丁（三溴乙醇+叔戊醇=1:1配成）；使用时用生理盐水进行稀释使用。 异氟烷使用需要面罩。 4.7.2.1.3小鼠止痛药物的选择 止痛剂 剂量 给药方式 效果 效果持续时间 阿司匹林 120 mg/kg PO 轻微止痛 - 丁丙诺啡 0.05-0.1mg/kg SC 中等止痛 8-12 Hours 卡洛芬 5 mg/kg SC 中等止痛 24 Hours 美洛昔康 5 mg/kg SC 中等止痛 24 Hours4.7.2.1.4 小鼠安乐死的药物和方法选择 药物或方法 剂量 试用动物 备注 戊巴比妥钠 100-200 mg/kg 所有小鼠 可接受方法 CO2 ---- 成年小鼠 可接受方法；幼龄动物和新生动物需要延长时间 颈椎脱臼 ---- 所有小鼠 条件可接受；操作人员需要接受培训，并具备熟练的技术4.7.2.2大鼠的镇静、麻醉、止痛和安乐死推荐药物和方法 4.7.2.2.1 大鼠镇静剂和诱导麻醉药物的选择 术前诱导麻醉药物 剂量 给药方式 效果 阿托品 0.05 mg/kg SC or IP 抗胆碱能作用；减少唾液，呼吸道分泌物，阻止血管迷走神经反射 氟胺酮 0.2-0.5 ml/kg IM 轻度/中度镇静，中度止痛； 安定 2.5-5 mg/kg IP or IM 轻微镇静作用；不能止痛 氯胺酮 50-100 mg/kg IP or IM 深度镇静，轻微止痛；缺乏肌肉松弛作用4.7.2.2.2 大鼠麻醉药物的选择 注射用 麻醉剂 剂量 给药方式 麻醉深度（轻度/外科麻醉） 持续时间 min 恢复时间 min 氯胺酮﹠安定 75mg/kg﹠ 5mg/kg IP 轻度麻醉 20-30 120 丙泊酚 10 mg/kg IV 外科麻醉 5 10 氟胺铜﹠ 安定 0.6ml/kg﹠ 2.5mg/kg IP or IP 外科麻醉 20-40 120-240 丙泊酚 10-12mg/kg（然后0.5-1.0mg/kg/min） IV 外科麻醉 1-12 hours 10-15 异氟烷 0.41ml/min at 4L/min Fresh gas flow (使用浓度2%) 吸入 外科麻醉 -- -- 三溴乙醇（阿弗丁） 300 mg/kg IP 外科麻醉 10-20 45-90注： 100%阿佛丁（三溴乙醇+叔戊醇=1:1配成）；使用时用生理盐水进行稀释使用。 异氟烷使用需要面罩。 4.7.2.2.3大鼠止痛药物的选择 止痛剂 剂量 给药方式 效果 效果持续时间 阿司匹林 100 mg/kg PO 中等止痛 - 卡洛芬 5 mg/kg SC 中等止痛 24 Hours 美洛昔康 5 mg/kg SC 中等止痛 24 Hours 丁丙诺啡 0.01-0.05mg/kg SC or IV 中等止痛 8-12 Hours 丁丙诺啡 0.1-0.25mg/kg PO 中等止痛 8-12 Hours4.7.2.2.4 大鼠安乐死的药物和方法选择 药物或方法 剂量 试用动物 备注 戊巴比妥钠 100-200 mg/kg 所有大鼠 可接受方法 CO2 ---- 成年大鼠 可接受方法；幼龄动物和新生动物需要延长时间 颈椎脱臼 ---- 体重＜200g 条件可接受；操作人员需要接受培训，并具备熟练的技术颈椎脱臼前需要进行麻醉处理4.7.2.3豚鼠的镇静、麻醉、止痛和安乐死推荐药物和方法 4.7.2.3.1 豚鼠镇静剂和诱导麻醉药物的选择 术前诱导麻醉药物 剂量 给药方式 效果 阿托品 0.05 mg/kg SC 抗胆碱能作用；减少唾液，呼吸道分泌物，阻止血管迷走神经反射 安定 5 mg/kg IP or IM 深度镇静作用 氟胺酮 1.0 ml/kg IP or IM 中度镇静，中度止痛； 氯胺酮 100 mg/kg IM 深度镇静，轻微止痛；缺乏肌肉松弛作用4.7.2.3.2 豚鼠麻醉药物的选择 注射用 麻醉剂 剂量 给药方式 麻醉深度（轻度/外科麻醉） 持续时间 min 恢复时间 min 氟胺铜﹠ 安定 1.0ml/kg﹠ 2.5mg/kg IP or IM﹠IP 外科麻醉 45-60 120-180 氟胺铜﹠ 安定 1.0ml/kg/h﹠ 2mg/kg（每4小时） IP ﹠IP 外科麻醉 1-12 hours 120-180 氯胺酮﹠ 安定 100 mg/kg﹠ 5mg/kg IM 保定/麻醉 30-45 90-120 异氟烷 0.41ml/min at 4L/min Fresh gas flow (使用浓度2%) 吸入 外科麻醉 -- --注： 异氟烷使用需要面罩。 4.7.2.3.3豚鼠止痛药物的选择 止痛剂 剂量 给药方式 效果 效果持续时间 阿司匹林 87 mg/kg PO 轻微止痛 - 卡洛芬 4 mg/kg SC 中等止痛 24 Hours 丁丙诺啡 0.01-0.05 mg/kg SC or IP 中等止痛 大约8-12 Hours4.7.2.3.4 豚鼠安乐死的药物和方法选择 药物或方法 剂量 试用动物 备注 戊巴比妥钠 100-200 mg/kg 所有豚鼠 可接受方法 CO2 ---- 成年豚鼠 可接受方法；幼龄动物和新生动物需要延长时间4.7.2.4兔子的镇静、麻醉、止痛和安乐死推荐药物和方法 4.7.2.4.1 兔子镇静剂和诱导麻醉药物的选择 术前诱导麻醉药物 剂量 给药方式 效果 阿托品 0.05 mg/kg IM 抗胆碱能作用；减少唾液，呼吸道分泌物，阻止血管迷走神经反射 安定 0.5-2 mg/kg IP or IM or IV 由轻到重度镇静；不能止痛 氟胺酮 0.2-0.5 ml/kg IM 轻到中度镇静，轻到深度止痛； 氯胺酮 25-50 mg/kg IM 中度缓解镇静，中度止痛；缺乏肌肉松弛作用4.7.2.4.2 兔子麻醉药物的选择 注射用 麻醉剂 剂量 给药方式 麻醉深度（轻度/外科麻醉） 持续时间 min 恢复时间 min 美索比妥 10-15mg/kg（使用浓度1%） IV 外科麻醉 4-5 5-10 丙泊酚 10 mg/kg IV 轻度麻醉 5-10 10-15 氟胺铜﹠ 安定 0.3ml/kg﹠ 1-2 mg/kg IM ﹠ IV 外科麻醉 20-40 60-120 氟胺铜﹠ 安定 0.1-0.3ml/kg/h﹠ 1mg/kg（每4 小时） IV ﹠ IV 外科麻醉 1-12 hours 60-120 异氟烷 0.41ml/min at 4L/min Fresh gas flow (使用浓度2%) 吸入 外科麻醉 -- -- 氯胺酮﹠ 安定 25 mg/kg﹠ 5mg/kg IM ﹠IM 外科麻醉 20-30 60-90注： 异氟烷使用需要“Bain's回路”或者“Ayre's三通管”。 4.7.2.4.3兔子止痛药物的选择 止痛剂 剂量 给药方式 效果 效果持续时间 阿司匹林 100 mg/kg PO 轻微止痛 不清晰 卡洛芬 4 mg/kg SC 中等止痛 24 Hours 丁丙诺啡 0.05-0.1mg/kg SC or IP 中等止痛 8-12 Hours4.7.2.4.4 兔子安乐死的药物和方法选择 药物或方法 剂量 试用动物 备注 戊巴比妥钠 100-200 mg/kg 所有兔子 可接受方法 CO2 ---- 成年兔子 可接受方法；幼龄动物和新生动物需要延长时间 颈椎脱臼 ---- 体重＜1 kg 条件可接受；操作人员需要接受培训，并具备熟练的技术(颈椎脱臼前需要进行麻醉处理)4.7.2.5犬的镇静、麻醉、止痛和安乐死推荐药物和方法 4.7.2.5.1 犬镇静剂和诱导麻醉药物的选择 术前诱导麻醉药物 剂量 给药方式 效果 阿托品 0.05 mg/kg SC or IM 抗胆碱能作用； 美托咪啶 10-100ug/kg SC or IM or IV 轻到深度镇静；轻到中度止痛 乙酰丙嗪 0.1-0.25 mg/kg IM 轻到中度镇静作用 氟胺酮 0.1-0.2 ml/kg IM 中度到深度镇静，中度止痛；4.7.2.5.2 犬麻醉药物的选择 注射用 麻醉剂 剂量 给药方式 麻醉深度（轻度/外科麻醉） 持续时间 min 恢复时间min 丙泊酚 5-7.5 mg/kg IV 外科麻醉 5-10 15-30 丙泊酚 5-7.5mg/kg（然后0.2-0.4mg/kg/min） IV 外科麻醉 20-30 15-30 丙泊酚 5-7.5mg/kg（然后0.2-0.4mg/kg/min） IV 外科麻醉 1-12 hours 10-15 异氟烷 0.41ml/min at 4L/min Fresh gas flow (使用浓度2%) 吸入 外科麻醉 -- -- 氯胺酮﹠美托咪啶 2.5-7.5 mg/kg﹠ 40ug/kg IM or IM 轻到中度麻醉 30-45 60-120注： 异氟烷使用需要“Bain's或者 MaGill回路”。 4.7.2.5.3犬止痛药物的选择 止痛剂 剂量 给药方式 效果 效果持续时间 卡洛芬 4 mg/kg SC 中等止痛 24 Hours 美洛昔康 0.2 mg/kg SC 中等止痛 24 Hours 丁丙诺啡 0.005-0.02 mg/kg SC or IP 中等止痛 8-12 Hours4.7.2.5.4 犬安乐死的药物和方法选择 药物或方法 剂量 试用动物 备注 戊巴比妥钠 100-200 mg/kg 所有犬 可接受方法 CO2 ---- 成年犬 可接受方法；幼龄动物和新生动物需要延长时间 氯化钾联合其他麻醉药 ---- 所有犬 条件可接受；操作人员需要接受培训，并具备熟练的技术（心内注射氯化钾前先进行麻醉处理）4.7.2.6小型猪的镇静、麻醉、止痛和安乐死推荐药物和方法 4.7.2.6.1 小型猪镇静剂和诱导麻醉药物的选择 术前诱导麻醉药物 剂量 给药方式 效果 阿托品 0.05 mg/kg SC or IM 抗胆碱能作用； 安定 1-2 mg/kg IM 轻到中度镇静作用； 氯胺酮 10-15 mg/kg IM 镇静；保定4.7.2.6.2 小型猪麻醉药物的选择 注射用 麻醉剂 剂量 给药方式 麻醉深度（轻度/外科麻醉） 持续时间 min 恢复时间 min 氯胺酮 10-15 mg/kg IM 镇静；保定 20-30 60-120 丙泊酚 2.5-3.5 mg/kg IV 外科麻醉 5-10 15-30 丙泊酚 2.5-3.5mg/kg（然后0.1-0.2mg/kg/min） IV 外科麻醉 20-30 15-30 丙泊酚 2.5-3.5mg/kg（然后0.1-0.2mg/kg/min） IV 外科麻醉 1-12 hours 10-15 异氟烷 0.41ml/min at 4L/min Fresh gas flow (使用浓度2%) 吸入 外科麻醉 -- -- 氯胺酮﹠ 安定 10-15 mg/kg﹠ 0.5-2mg/kg IM ﹠IM 保定/轻度麻醉 20-30 60-90注： 异氟烷使用需要“Bain's或者 MaGill回路”或者“循环系统”。 4.7.2.6.3小型猪止痛药物的选择 止痛剂 剂量 给药方式 效果 效果持续时间 卡洛芬 2-4 mg/kg SC 中等止痛 24 Hours 丁丙诺啡 0.01-0.05mg/kg SC or IP 中等止痛 8-12 Hours4.7.2.6.4 小型猪安乐死的药物和方法选择 药物或方法 剂量 试用动物 备注 戊巴比妥钠 100-200 mg/kg 所有小型猪 可接受方法 CO2 ---- 成年小型猪 可接受方法；幼龄动物和新生动物需要延长时间 氯化钾联合其他麻醉药 ---- 所有小型猪 条件可接受；操作人员需要接受培训，并具备熟练的技术（心内注射氯化钾前先进行麻醉处理） 打击头部 ---- 幼龄猪周龄 条件可接受；要求技术，充分保定，和适当的力量4.7.2.7非人灵长类的镇静、麻醉、止痛和安乐死推荐药物和方法 4.7.2.7.1 非人灵长类镇静剂和诱导麻醉药物的选择 术前诱导麻醉药物 剂量 给药方式 效果 阿托品 0.05 mg/kg SC or IM 抗胆碱能作用；减少唾液，呼吸道分泌物，阻止血管迷走神经反射 安定 1 mg/kg IM 轻到中度镇静 氯胺酮 5-25 mg/kg IM 中度镇静；保定；轻微止痛；4.7.2.7.2 非人灵长类麻醉药物的选择 注射用 麻醉剂 剂量 给药方式 麻醉深度（轻度/外科麻醉） 持续时间 min 恢复时间 min 丙泊酚 7-8 mg/kg IV 外科麻醉 5-10 10-15 氯胺酮﹠ 美托咪啶 5 mg/kg﹠ 0.05mg/kg IM ﹠IM 外科麻醉 30-40 60-120 丙泊酚 7-8 mg/kg （然后0.3-0.6mg/kg/min） IV 外科麻醉 1-12 hours 10-15 异氟烷 0.41ml/min at 4L/min Fresh gas flow (使用浓度2%) 吸入 外科麻醉 -- -- 氯胺酮﹠ 安定 15 mg/kg﹠ 1mg/kg IM ﹠IM 外科麻醉 30-40 60-90注： 异氟烷使用需要“Bain's回路或者 Ayre's三通管（体重10 kg）”。 4.7.2.7.3非人灵长类止痛药物的选择 止痛剂 剂量 给药方式 效果 效果持续时间 氟胺铜 0.3ml /kg IM 良好止痛 - 卡洛芬 3-4 mg/kg SC 中等止痛 24 Hours 美洛昔康 0.1-0.2 mg/kg SC 中等止痛 24 Hours 丁丙诺啡 0.005-0.01 mg/kg IM or IV 中等止痛 8-12 Hours 吗啡 1-2 mg/kg SC or IM 中等止痛 4 Hours4.7.2.7.4 非人灵长类安乐死的药物和方法选择 药物或方法 剂量 试用动物 备注 戊巴比妥钠 100-200 mg/kg 所有非人灵长类 可接受方法 吸入麻醉CO2 ---- 成年非人灵长类 可接受方法；幼龄动物和新生动物需要延长时间4.7.2.8鸟的镇静、麻醉、止痛和安乐死推荐药物和方法 4.7.2.8.1 鸟镇静剂和诱导麻醉药物的选择 术前诱导麻醉药物 剂量 给药方式 效果 氯胺酮（>1 kg） 15-20 mg/kg IM 轻微止痛；保定 氯胺酮（ |
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