一种改良的简易灌注分离小鼠肝细胞的方法

宋荣景

;

司霞

;

陈月

;

冯婉玉

【摘

要】

目的

探讨一种改良的简易灌注分离小鼠肝细胞的方法。方法

采用改良的

简易两步灌注法分离小鼠肝细胞

,

即使用连有头皮针的注射器进行肝门静脉插管并

灌流冲洗

,

再用Ⅳ型胶原酶灌流消化

;

分离肝细胞后采用室温静止法进行纯化

;

利用锥

虫蓝染色法鉴定细胞存活率

;

培养板预先用鼠尾胶原铺备

,

利用倒置显微镜观察细胞

形态

;

细胞贴壁后

1~10d

检测培养液上清液中的白蛋白的分泌情况

,

判断肝细胞的

生物学活性和功能。结果成功建立了一种简单易行的分离与培养小鼠原代肝细胞的

方法。培养的小鼠肝细胞在接种后

4h

基本完成贴壁

,

细胞可稳定贴壁至少

1

周

,

成

活率可达

85%

以上且功能良好

,

可用于后续实验。结论

改良的简易两步灌注法是一

种简单易行、经济高效的分离纯化小鼠肝细胞的方法

,

适合小鼠肝细胞的分离。

【期刊名称】

《精准医学杂志》

【年

(

卷

),

期】

2018(033)006

【总页数】

4

页

(P539-541)

【关键词】

肝细胞

;

细胞分离

;

原代细胞培养

;

小鼠

【作

者】

宋荣景

;

司霞

;

陈月

;

冯婉玉

【作者单位】

[1]

北京大学人民医院药剂科

,

北京

100044;[1]

北京大学人民医院药剂

科

,

北京

100044;[1]

北京大学人民医院药剂科

,

北京

100044;[1]

北京大学人民医院

药剂科

,

北京

100044;

【正文语种】

中

文