AP为胰酶消化自身胰腺及周围组织所引起的化学性炎症[9], 临床症状轻重不一. 当前, 对于AP的发病机制仍未完全清楚[10,11], 缺乏对轻型向重型相互转归的认识, 以及采取有效地干预手段阻止AP向重型的发生发展. 这就需要建立动物模型来模拟人类AP来进行研究.

尽管很多的动物种属都可以用来诱导AP模型, 包括兔子[12]、猫、狗、猪等, 最广泛使用的动物仍是啮齿类动物[13,14], 尤其是小鼠, 因为他更容易标准化和易于获得; 更重要的是, 更方便对小鼠遗传性状操作来诱导基因敲除和转基因动物, 进行更深入的机制探讨[15]. 本课题组正是采用小鼠作为建立模型的对象.

过去150年, 许多学者设计了不同的动物模型来研究AP的发病机制[16]. 这些模型有力地推动了对该疾病的细胞生物[17]、遗传性状[18,19]和分子机制认识, 以及对新的治疗手段的尝试. 就探讨发病机制和病因学的角度而言, CAE诱导的AP模型仍然被最广泛使用[20]. CAE是胆囊收缩素的肽类似物, 能强烈刺激胰腺的外分泌, 使胰蛋白水解酶大量释放, 引起胰腺腺泡的自身消化诱导AP模型[21,22]. 自从1977年Lampel[23]首先报道成功利用CAE诱导AP动物模型以来, 由于具有快速诱导、非侵入性、高重复性、高实用性的特点以及典型的AP组织学改变, CAE诱导的AP模型已经成为最广泛采用的AP模型之一.

早期的用药途径是通过静脉给药, 需要插入大鼠尾静脉和颈静脉导管, 后来的学者改进为经腹腔注射, 还有学者认为腹腔内给药往往能获得更为严重和持久的损害[24,25]. 用药剂量的研究发现, CAE在0-50 μg/kg的剂量范围内炎症的严重程度是剂量依赖性的, 但超过50 μg/kg后, 腺泡的最大损害程度不再随剂量的增加而有显著的加重, 因此50 μg/kg是较为合适的剂量浓度[6].

目前, 在用小鼠诱导AP模型时, 较为公认方法是用CAE (50 μg/kg)腹腔注射7次, 每次间隔1 h, 但这往往仅能诱导轻型胰腺炎[14,25,26], 这在我们的实验中也得到了证实. 如果要复制重型AP, 需要加大注射次数或者加注LPS[27,28], 但是文献报道不一致: 有的文献报道13次注射CAE可以诱导胰腺发生坏死性的炎症改变[27]; 有的学者则认为, 7次CAE注射后, 需要加注一次大剂量的LPS (10 mg/kg)触发所谓的"二重伤害", 即胰腺的炎症加细菌感染, 从而加重炎症反应从局部向全身发展[29].

为了建立比较可靠的重型AP模型, 本实验组就不同的建模方法进行验证. 通过浓度梯度, CAE的浓度采用经典的50 μg/kg, 而LPS浓度选择15 mg/kg. 结果发现, CAE 7组的淀粉酶及脂肪酶较对照组显著增高, 组织学结果显示胰腺组织广泛的水肿, 炎细胞浸润, 无明显出血坏死, 符合轻型胰腺炎的病理特征. CAE 7+LPS组病理改变与CAE 7组相似. CAE 13+LPS组的淀粉酶及脂肪酶升高幅度在CAE 7组的基础上又有所增加, 出现明显的坏死、出血、炎症浸润, 胰外器官不同程度的损害, 符合重型AP的病理特征. CAE 13组胰腺坏死程度介于CAE 7+LPS组与CAE 13+LPS组之间, 总体来说坏死程度不典型.

总之, 7次腹腔注射CAE可以成功诱导轻型AP, 13次腹腔注射CAE加末次LPS注射更容易诱导典型的重型AP. 单独使用CAE和CAE联合LPS诱导不同的AP模型, 与人类AP的病程及组织学改变相似[30], 对于研究AP的发病机制和转归提供了良好的动物模型.