定位和定性是免疫组化最大的优势。相比于其他蛋白检测方法，免疫组化具有定位较直接准确、定性灵敏度高，是定位检测分析首选方法，尤其对于有些因子的转位研究十分有用。免疫组织化学的临床应用主要包括以下几方面：

近年来，随着免疫组织化学技术的发展和各种特异性抗体的出现，使许多疑难肿瘤得到了明确诊断。免疫组化在肿瘤诊断和鉴别诊断中的实用价值受到了普遍的认可，其在低分化或未分化肿瘤的鉴别诊断时，准确率可达50%-75%。

根据标记物的不同（标记物有荧光染料、放射性同位素、酶、铁蛋白、胶体金等），免疫组化方法可以分为：免疫酶法、免疫荧光法、亲和组织化学法、免疫铁蛋白法、免疫金法及放射免疫自影法等。其中比较常用的是免疫酶法、免疫荧光法、亲和组织化学法，本文以免疫酶法为例，对免疫组化的操作流程做一介绍。

即用型Elivision快速酶免疫组化二步法的孵育及显色流程：一抗+酶标二抗+辣根酶底物显色。 SP法的孵育及显色流程：一抗+生物素二抗+滴加试剂SP（链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶复合物）+辣根酶底物显色，SP是最常用的实验方法。 ABC法的孵育及显色流程：一抗+生物素二抗+滴加试剂ABC（卵白素-生物素-过氧化物酶复合物）+辣根酶底物显色。 SABC法的孵育及显色流程：一抗+生物素二抗+滴加试剂SABC（链霉卵白素-辣根酶标记生物素复合物）+辣根酶底物显色。

免疫组化实验通常需要设置阳性对照、阴性对照（或替代对照）（阳性对照是排除方法和实验系统有无问题；阴性对照与替代对照是排除有无非特异性染色）。 一般情况下，阳性对照颜色的特点为：Ag定位，包浆、胞核、胞膜、间质具有结构性。且染色的强度不同（颜色深浅不一）；阴性对照的特点为：染色细胞与组织无区别，颜色具有弥散性，分布均匀。

注：+表示实验有特异性染色；-表示实验无特异性染色 上表为免疫组化实验中可能出现的结果，由上表可以看出，只有6、7组的实验结果有意义。1~5的实验结果因IHC技术操作存在错误等原因使对照组的实验结果失去对照意义，必须重复实验或者换用Ab。 说明：免疫组化实验可以对结果进行定量分析，但要实验得到的必须是高质量的染色切片，要求背景染色浅且特异性染色较深，这样分析的结果才会比较准确。

注释：[1] 半定量是介于定性与定量之间的一种分析方法， 指虽然可以得到一个量值，但是这个量值只能从趋势上进行分析，例如大量、少量、微量、痕量等，而得不到一个具体的数值（例如浓度等）。