教你怎么查基因启动子、转录因子结合位点,不懂来看~ |
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想做Luciferase、点突变、截短、ChIP,不知如何入门,转录因子与promoter结合位点不知道怎么找?看完这篇文章轻松拿下~接下来就是愉快的通过实验验证了! · 正 · 文 · 来 · 啦 · 基础知识: 启动子(promoter):与RNA聚合酶结合并能起始mRNA合成的序列。一般选择CDS区上游2 kb。 UTR(Untranslated Regions):即非翻译区,是信使RNA(mRNA)分子编码区(CDS)两端的非编码片段。 5’-UTR从mRNA起点的甲基化鸟嘌呤核苷酸帽延伸至AUG起始密码子,3’-UTR从编码区末端的终止密码子延伸至多聚A尾巴(Poly-A)的末端。 1. 打开PubMed:https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed。 2.选取【Gene】,在旁边输入IL7,点search,按下图示意,根据物种进行选择,我们以人源为案例,点击第二个: 3. 下拉至下图位置,可以看到这个基因的信息: 点Tools,选择Sequence Text View: 还可以看到序列信息: 4. 上面的部分只是该基因的一些信息,可以用来查找相应的UTR等区域,接下来我们进入正题,寻找promoter区域。把网页拉到如下图位置,点击FASTA: 5. 基因位置信息如下图: 6. 一般认为:基因上游2 kb区域为该基因的promoter区域,所以我们将基因上游的2 kb序列调先出来: 复制上述序列,这就是基因的启动子序列了。 2. 转录因子结合位点的预测3. 得到28条转录因子NFAT与IL17A的结合位点,Strand -1没有特殊意义,选择Strand 1即可。 4. 好了,转录因子与promoter结合位点已经有了,接下来就是愉快的通过实验验证了!Luciferase、点突变、截短、ChIP等统统拉上来就可以了! 本文转载自公众号“U平台”(ID: uptbio)
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