温室园艺

温室栽培

Greenhouse Culture

2021-01

68

双孢蘑菇液体培养基配方优化

*

  查 磊，仝宗军，黄建春，李正鹏，郭 倩

**

（上海市农业科学院食用菌研究所，上海国森生物科技有限公司，上海 201403）

DOI: 10.16815/j.cnki.11-5436/s.2021.01.014

|

摘要

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以生产常用液体菌种的基础配方作为基准配方，对双孢蘑菇液体培养基配方的碳源、氮源、pH

进

行了优化，并进行培养时间的确定，根据优化的结果选择黄豆粉

2 

g、玉米粉

2 

g、蔗糖

20 

g、磷酸二

氢钾

1 

g、硫酸镁

0.5 

g、水

1 

L

作为最终配方，且培养时间选择为

12

天，对所筛选到的配方进行发酵

罐实验，最终发酵罐发酵

6 L

液体菌种，可生产湿重菌丝

480 g，且菌球大小均匀，菌球密度大。

双

孢

蘑

菇

(

Agaricus bisporus

)

又称蘑菇、白蘑菇、洋蘑

菇、

纽

扣

蘑

菇，

味

道

鲜

美，

是

一

种

富

含

氨

基

酸、

蛋

白

质

的

低

脂

肪

健

康

食

材

[1]

。

近

年

来，

随

着

栽

培

面

积

的

扩

大

和

产

量

的

增

加，

中

国

已

成

为

双

孢

蘑

菇

生

产

和

出

口

大

国

之

一

[2]

，

但

生

产

方

式大多比较落后，

菌种扩繁时，

多

采

用

固

体

逐

级

扩

大

的

方

式，

发

菌

时

间

较

长，

导

致

生

产

成

本

较高

[3-5]

。

而

采

用

液

体

菌

种

接

种

双

孢

蘑

菇

栽

培

种

可

以

有

效

解

决

这

一

问

题。

通

过

液

体

菌

种

接

种

栽

培

种

可

以

提

高

双

孢

蘑

菇

栽

培

菌

种

菌

丝

的

生

长

速

度，

提

高

菌

龄

的

一

致

性，

对

双

孢

蘑

菇

菌

种

生

产

具

有

重

要

意

义，

可

促

进

中

国

双

孢

蘑

菇

的

生

产

向

高

质

量、

标

准

化、

周

年

化、

工

厂

化

的

生

产

方

向

发

展

[6]

。

基

于

以

上

原

因，

笔

者

对

双

孢

蘑

菇

液

体

菌

种

进

行

研

究，

以

期

为

双

孢

蘑

菇

菌

种

生

产

提供技术依据。

菌丝湿重的称量方法

取

培

养

好

的

液

体

菌

种，

进

行

过

滤，

将

过

滤

得

到

的

菌

丝

体

3000 r/min

离

心，

弃

上

清，

对

菌

丝

湿

重

进

行

称

重，

即

为

菌

丝

湿重。

适宜

pH 筛选

对

液

体

菌

种

的

适

宜

pH

进

行

确

定，

通

过

K

2

HPO

4

和

KH

2

PO

4

作

为

缓

冲

剂

对

双

孢

蘑

菇

液

体

菌

种

的

pH

进

行

调

整。

K

2

HPO

4

和

KH

2

PO

4

的的添加量

如

表

1

。

并

对

其

灭

菌

前

后

的

进

行了

pH

、菌丝干重以及菌丝形

态进行了记录。

表

1 

培

养

基

K

2

HPO

4

和

KH

2

PO

4

的

添加量

/（g/L）

编号

U

V

W

X

Y

K

2

HPO

4

0

0.25

0.5

0.75

1

KH

2

PO

4

1

0.75

0.5

0.25

0

材料与方法

培养基的优化

以

生

产

常

用

的

液

体

菌

种

配

方（

黄

豆

粉

4 g

、

蔗

糖

20 g

、

K

H

2

P

O

4

1 g

、

硫

酸

镁

0.5 g

、

水

1 L

）

作

为

基

准

配

方，

进

行

优化。

培养时间

以

基

准

配

方

作

为

实

验

配

方，制作液体菌种，在

500 mL

的

三

角

瓶

中

分

装

250 mL

培

养

基，进行

121

℃、

30 min

灭菌，

待

冷

却

后，

接

种

3 mm

菌

块

10

块，

在

25

℃、

150 r/min

的

摇

床

中

进

行

培

养，

对

液

体

菌

种

生

长

过

程

中

第

8~24

天

菌

丝

干

重

的变化情况进行了记录。

菌丝干重的称量方法

滤

纸

烘

干

至

恒

质

量

称

量，

记

为

m

1

，

取

培

养

好

的

液

体

菌

种，真空泵抽滤，得到菌丝体，

菌

丝

体

与

滤

纸

烘

干

至

恒

质

量

称

量，

记

为

m

2

，

即

菌

丝

干

重

为

m

2

-m

1

。

适宜碳源筛选

对

液

体

菌

种

的

适

宜

碳

源

进

行

筛

选，

选

择

蔗

糖、

红

糖、

葡

萄

糖、

可

溶

性

淀

粉、

麦

芽

糖、

甘露醇、

海藻糖、

乳糖、

山梨醇、

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