专性厌氧菌的培养方法 |
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专性厌氧菌的介绍 根据细菌生长对氧的需求,主要可分为四大类:专性需氧菌、兼性厌氧菌、专性厌氧菌、微需氧菌。 专性厌氧菌需要在严格无氧的气体环境中生长,氧气会对菌产生毒害作用,也有一些厌氧菌在含5%-10%二氧化碳气体环境中可耐受低浓度的氧气。常见的专性厌氧菌有梭菌属(如产气荚膜梭菌、肉毒梭菌、破伤风梭菌、艰难梭菌等)、双歧杆菌属(如婴儿双歧杆菌、动物双歧杆菌等)、拟杆菌属、梭杆菌属、厌氧消化链球菌属等。 (1)使用厌氧培养箱,通气培养。一些厌氧培养箱可同时进行接种等微生物操作,并直接进行培养,操作方便,成功率高,缺点是多数实验室不具备,损耗较大,对于小规模的培养试验来说,成本较高。 (2)使用厌氧罐、厌氧盒或厌氧培养袋+厌氧产气包,可制作小型或中型空间的厌氧环境,操作方便,不需要任何复杂的专门设备,可在所有实验室中使用,非常适合实验室中小规模的试验操作。 注意事项:培养基必须与厌氧环境气体流通,如使用试管、锥形瓶等容器培养,必须确保塞子透气;培养平皿时,必须保证平皿的透气性良好,不能使用封口膜密闭缠绕。 (3)液体培养基可采用覆盖石蜡隔绝氧气的方法,如疱肉培养基、梭菌增菌培养基等,在培养基配制完成分装后,在培养基上方覆盖约0.5-1cm厚度的液体石蜡,再进行灭菌处理,可直接进行厌氧菌的培养,无需使用厌氧培养箱或厌氧罐等设备。 注:在灭菌前覆盖石蜡,灭菌过程中培养基中溶解的氧气会逸出,冷却后石蜡会阻隔空气中氧气的进入,可以更好的制造厌氧环境;培养基中也可补加一定量的还原性铁粉或硫乙醇酸钠、半胱氨酸等还原性成分,帮助维持厌氧环境。 (4)有些培养基可自然的形成厌氧环境,无需厌氧培养,如硫乙醇酸盐流体培养基,静置过程会自发分层,下层为无氧环境,无需任何厌氧设备,也无需覆盖液体石蜡,即可培养厌氧菌。 常见的厌氧菌培养 1.硫乙醇酸盐流体培养基 此培养基常用于梭菌的活化及增菌培养,也可对营养成分进行改良用于一些营养要求较高的厌氧菌的培养,此培养基静置过程会自发分层,下层为无氧环境,无需任何厌氧设备,也无需覆盖液体石蜡,即可培养厌氧菌。 2.疱肉培养基 相比较于硫乙醇酸盐流体培养基,此培养基需覆盖液体石蜡,用于培养梭菌时,可以存活更长时间(如生孢梭菌,在硫乙醇酸盐流体培养基中只能存活数天,而在疱肉培养基中可存活数月以上)。 展开全文3.GAM/改良GAM培养基 此培养基营养非常丰富,适用于绝大多数的厌氧菌培养,特别是用于比较难培养的营养苛求型细菌(如拟杆菌属)。 4.血平板/CDC厌氧菌琼脂 营养丰富,适用于绝大多数厌氧菌的培养(梭菌、拟杆菌等均可培养)。 5.MRS琼脂/肉汤 用于双歧杆菌的培养,制备好的MRS肉汤培养基澄清透明无沉淀,常用于乳酸菌或双歧杆菌的活化、增菌及收集菌体。 灰藻生物 专注于微生物、细胞和分子生物资源的开发和交流 兼有ATCC原装菌株 和ScienCell原代细胞代理等技术服务 致力于为任何有需要的客户 提供专业、稳定、优质的生物资源 争做“生命科学研究的好伙伴”返回搜狐,查看更多 责任编辑: |
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