细胞培养液上清中的蛋白如何提取? |
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如何提取蛋白质？
对于每个大肠杆菌表达的目的蛋白，确定其产生、定位及估计培养基或细胞中的产量都相当重要。为了简化确定工作，通常对总细胞蛋白及培养液、周质、可溶胞质和不溶胞质部分进行小规模分析。分析的结果有利于诱导条件优化或确定大规模诱导条件，以及采用合适的 Western印迹法（试剂配制和操作步骤）-4操作步骤： （一） 蛋白样品制备 （1） 单层贴壁细胞总蛋白的提取： 1、倒掉培养液，并将瓶倒扣在吸水纸上使吸水纸吸干培养液（或将瓶直立放置一会儿使残余培养液流到瓶底然后再用移液器将其吸走）。 2、每瓶细胞加3ml 4℃预冷的PBS（0.0 蛋白质印迹法的样品制备1、单层贴壁细胞总蛋白的提取： （1）倒掉培养液，并将瓶倒扣在吸水纸上使吸水纸吸干培养液（或将瓶直立放置一会儿使残余培养液流到瓶底然后再用移液器将其吸走）。 （2）每瓶细胞加3ml 4℃预冷的PBS（0.01M pH7.2～7.3）。平放 蛋白质印迹法的操作步骤 怎样提取干细胞中的蛋白 蛋白质免疫印迹（Western Blot ）-底物化学发光 ECL 法 Western Blot 蛋白样品制备 蛋白质免疫印迹（Western Blot ）（二） 【锐赛小课堂】WB生物样本总蛋白抽提 蛋白质印迹法所需样本的制备方法 WB生物样本总蛋白抽提 蛋白质印迹法操作步骤 蛋白质印迹法速成知识ABC 蛋白质印迹法的操作步骤 蛋白质印迹法的操作步骤 蛋白质印迹法的操作步骤 |
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