Aβ寡聚体的制备与鉴定 |
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阅读量: 2126 作者: 马艳,杜怡峰 展开 摘要: 目的研究制备和鉴定Aβ寡聚体的方法.方法 Aβ寡聚体的制备(1)Aβ单体化:用HFIP分别溶解Aβ42和Aβ25-β5使其浓度分别达到1mmol/L和1 mg/ml;将HFIP-Aβ42溶液在室温下孵育30min,HFIP-Aβ25-35溶液在室温下孵育24h;在生物安全柜中把HFIP蒸发干净;把经过HFIP处理过的Aβ42和Aβ25-35分别用无水DMSO溶解至浓度5mmol/L和1mmol/L.(2)Aβ单体聚集成寡聚体:用F12培养液稀释DMSO-Aβ42溶液使其浓度达到100mmol/L,转移到4oC的条件下孵育24h;用PBS稀释DMSO-Aβ25-35溶液使其浓度达到40mmol/L,转移到4oC的条件下孵育48h.(3)Aβ寡聚体的鉴定:(1)分组:Aβ42+DMSO+F12(孵育1h,24h);Aβ25-35+DMSO+PBS(孵育1h,48h);DMSO+F12(孵育24h);DMSO+PBS(孵育48h).(2)将以上各组在规定的时间内用透射电镜放大6万到10万倍观察. 展开 会议名称: 2011全国老年痴呆与衰老相关疾病学术会议第三届山东省神经内科医师(学术)论坛 会议地点: 中国山东济南 |
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