1. 强烈建议谨慎使用免疫组化以保存组织进行分子检测，尤其是在小样本中。当腺癌或鳞状细胞癌为低分化时，很难或无法利用明确的形态学标准进行明确的诊断。在这种情况下，免疫组化或粘蛋白染色可能是必要的，以确定特定的诊断。

2. 在小样本中，一个肺腺癌标记物（TTF1，napsin A）和一个鳞癌标记物（p40，p63）的即可解决大部分诊断问题。实际上，所有缺乏鳞状细胞形态并显示p63和TTF1共同表达的肿瘤都更好地被归类为腺癌。TTF1和p40的简单组合可能足以对大多数NSCC-NOS病例进行分类。

3. 在所有缺乏腺体分化或特定病因的低分化癌中，尤其是在非吸烟者或年轻患者中，应考虑通过免疫组织化学检测NUT的表达，以考虑为肺NUT癌。

4. 应采用免疫组织化学方法鉴别原发性肺腺癌与鳞癌、大细胞癌、转移性癌和原发性胸膜间皮瘤（尤其是胸膜标本）。

5. 原发性肺腺癌：

5.1 对于原发肿瘤来源不明的患者，建议进行适当的免疫组化染色，以评估是否有肺转移癌。

5.2  TTF1是Nkx2基因家族中含有同源结构域的核转录蛋白，在胚胎和成熟肺和甲状腺的上皮细胞中表达。在大多数（70%-90%）的非粘液性腺癌亚型中，TTF1在原发性肺腺癌中呈阳性表达。转移性肺腺癌TTF1几乎总是阴性，除了转移性甲状腺恶性肿瘤，在这种情况下甲状腺球蛋白和PAX8也是阳性的。在其他器官（妇科、胰胆管）肿瘤中TTF1阳性的罕见病例已被注意到，可能与所使用的特定TTF1克隆有关，强调了临床和放射学特征相结合的重要性。

5.3  Napsin A是一种天冬氨酸蛋白酶，在正常Ⅱ型肺泡细胞和近、远端肾小管中表达，似乎在＞80%的肺腺癌中表达，可能是TTF1的有用辅助手段。

5.4在以前被归类为NSCC NOS的小活检标本中，TTF1（或Napsin A替代）和p40（或P63替代）的组合对腺癌或鳞癌的诊断可能是有用的。

6. 当有神经内分泌形态的形态学证据（如斑点染色质图案、核型、周边栅栏状排列）时，应采用免疫组化方法确认神经内分泌分化：

6.1对于神经内分泌分化存在形态学怀疑的病例，可使用NCAM（CD56）、嗜铬粒蛋白及突触素来鉴别神经内分泌肿瘤。

6.2虽然一系列的标记物都是有用的。但可只用一种标志物，只要在超过10%的肿瘤细胞中染色是清楚的。

7. 恶性间皮瘤与肺腺癌的鉴别

7.1肺腺癌和恶性间皮瘤（上皮样型）可以通过组织学与临床表现、影像学检查和一组免疫标记物的相关性来区分。

7.2对间皮瘤敏感和特异的免疫染色包括WT-1、Calretinin、CK5/6和D2-40（在腺癌中通常为阴性）。

7.3对腺癌敏感和特异的免疫染色包括pCEA、Claudin 4、TTF1和Napsin A（间皮瘤阴性）。其他可能有用的标记物包括B72.3、Ber-EP4、MOC31和CD15，这些标记物敏感性和特异性较前面的较差。

7.4泛角蛋白如AE1/AE3也是有用的，因为阴性结果提示有其他肿瘤的可能性。

7.5其他标记物有助于间皮瘤和转移性癌的鉴别诊断，也有助于确定肿瘤来源。例如：肺腺癌（TTF1和Napsin A）、乳腺癌（ERα、PR、GCDFP15、MAMMALOBIN和GATA-3）、肾癌（PAX8）、乳头状浆液性癌（PAX8、PAX2和ER）、胃肠道腺癌（CDX2）和前列腺癌（NKX3.1.1）。此外，p40（或p63）有助于鉴别假鳞状上皮样间皮瘤和鳞状细胞癌。