抗体亚型 |
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抗体亚型的鉴定 亚型指的是相同的构成方式，但是空间结构不同的蛋白质结构。抗体亚型，指的是在机体内产生的“Y”构型的免疫球蛋白（Ig），基于小分子多肽结构上的差异，可以进一步的进行细分。 抗体亚型重链抗体以一个或者多个“Y”字形单体存在,每个“Y”字形单体由 4 条多肽链组成,包含两条相同的重链和两条相同的轻链。 通常，抗体的种类由重链决定。例如哺乳动物Ig的重链一共有五种,分别用希腊字母α、δ、ε、γ和 μ 来命名,相对应组成的抗体就称为 IgA、IgD、IgE、IgG 和 IgM。其中，人的γ可以进一步细分为γ1、γ2、γ3、γ4等亚类，分别对应IgG1, IgG2, IgG3和IgG4四个亚型，小鼠γ可以进一步细分为γ1、γ2a、γ2b、γ3等亚类，分别对应IgG1, IgG2a, IgG2b和 IgG3四个亚型。 轻链哺乳动物有两种轻链：λ型和κ型。出于科研的需要，人们也会对轻链的亚型进行鉴定。 类/亚类重链轻链分子量（kDa）结构功能IgA1IgA2α1α2λ或κ150-600单体-四聚体IgA有血清型和分泌型，血清型IgA不显示重要的免疫功能，分泌型IgA存在于分泌液中，如唾液、泪液、初乳、鼻和支气管分泌液等，是机体粘膜局部抗感染免疫的主要抗体。IgDδλ或κ150单体功能不详；与IgM共同存在于B细胞发育的各个阶段；大部分与B细胞结合。IgEελ或κ190单体结合变应原引发巨细胞释放组胺，可以对抗寄生虫感染。IgG1IgG2IgG3IgG4γ1γ2γ3γ4λ或κ150单体血清中最主要的免疫球蛋白。在免疫反应中最主要的抵御病原的侵袭的抗体为IgG;可通过胎盘。IgMμλ或κ900五聚体最早产生的反应性抗体，在B细胞表面表达，分泌型有很高的亲和力。在B细胞介导的免疫反应早期，产生足够的IgG之前发挥消除病原菌的作用。表1：不同亚型抗体的结构与功能 抗体亚型鉴定抗体亚型鉴定的原理是利用酶联免疫吸附实验（ELISA），测定待测抗体与不同亚型特异性的抗体的结合情况，找出可以与待测抗体特异性结合的抗体，由于与待测抗体结合的抗体的特异性都是已知的，依据结合抗体的特异性可以得出待测抗体的亚型。以小鼠抗体亚型的测定为例，利用ELISA测定待测抗体与针对小鼠IgG1、IgG2A、 IgG2B、 IgG3、IgM、λ、κ有特异性的抗体的结合情况。如果待测抗体抗体可以与针对小鼠IgG1的特异性抗体结合（通过肉眼观察颜色深浅或通过测OD值判断），则该抗体的亚型为IgG1。以此类推，也可以测出轻链的亚型。鉴定方法目前比较常用的方法是利用试剂盒进行抗体亚型的鉴定，按照试剂盒说明书进行操作，便可以直观的读出抗体的亚型。 利用试剂盒鉴定抗体亚型常见问题与解决方法：常见问题可能原因解决方案多种重链结果腹水中有杂抗体将腹水样本至少 1:100000稀释样本中抗体浓度过高再将样本 1:2-1:10 稀释杂交瘤细胞中含有多种细胞系亚克隆杂交瘤细胞显色较慢或颜色较弱样本中抗体浓度低减少稀释倍数；延长显色时间结果难以判定多种重链或轻链结果再将样本 1:4 或 1:8 稀释后重新检测表2：常见问题与解决方案 抗体亚型鉴定的意义不同亚型的抗体在结构上有所区别，其免疫源性与在体内发挥的作用存在差异，对抗体进行进一步的细分，并进行抗体亚型鉴定，对于疾病作用机理的研究、抗体药物的开发有重要意义。 相关服务抗体亚型鉴定服务:IgG1，IgG2a，IgG2b，IgG3，IgM，IgA的鉴定。 更多阅读抗体配对 抗体标记 |
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