乙醇沉淀

dna

和异丙醇沉淀

dna

的区别

异丙醇和酒精都是有机溶剂，一般来讲，提取质粒的时候一开始都要用异丙醇沉淀，因为

异丙醇沉淀的效果要好一些，但最后大多用酒精沉淀，因为酒精容易挥发，对下游的实验

影响小

异丙醇比较疏水，能很更好地沉淀核酸，用乙醇的目的是去盐，它比异丙醇更亲水，

所以能去掉一些盐离子。

有时还用

70%

的乙醇洗样品也是为了增加盐的溶解度。

在沉淀核酸时可用乙醇与异丙醇，乙醇的极性要强于异丙醇，所以一般用

2

倍体积乙醇沉

淀，但在多糖、蛋白含量高时，用异丙醇沉淀可部分克服这种污染，尤其用异丙醇在室温

下沉淀对摆脱多糖、杂蛋白污染更为有效。

异丙醇沉淀核酸时，高浓度盐存在将使大量多糖存在在溶液中，从而可达到去多糖的

作用。但高浓度的盐存在会影响核酸的进一步操作，因此必须用乙醇多次洗涤脱盐。

异丙醇：

优点：所需容积小且速度快，适用于浓度低，而体积大

DNA

样品的沉淀。

0.54~1.0

倍

体积的异丙醇可选择性沉淀

DNA

和大分子

rRNA

和

mRNA

；

但对

5sRNA

、

tRNA

和多糖产物不产

生沉淀，一般不需要在低温条件下长时间放置。

缺点：易使盐类（如

NaCl

、蔗糖）与

DNA

共沉淀；在

DNA

沉淀中异丙醇难以挥发除去，

所以常规需要用

70

％的乙醇漂洗

DNA

沉淀数次。

乙醇：

沉淀

DNA

乙醇是首选的有机溶剂，对盐类沉淀少，

DNA

沉淀中所含的衡量乙醇易蒸

发去处，

不影响以后的实验。

在适当的盐浓度下，

2

倍样品容积的

95

％乙醇可有效沉淀

DNA

，

对于

RNA

则需要将乙醇量增加至

2.5

倍

.