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1、 PCR上岗证考试题及答案（全）一、 选择题（共20题，每题2分）1在核酸提取时,常需使用氯化钠、醋酸钠等盐溶液,其目的是:(A)A中和核酸的负离子,使其易于沉淀B调节PH值C保证核酸的完整性D无特定目的2临床上使用核酸扩增方法诊断沙眼衣原体感染,在标本收集上最为关键的是(B)A标本的采取方式B标本的保存方式C标本的运送方式D标本采取的时间3之所以要将基因扩增检验实验室的产物分析区设置为负压状态,目的是:(B)A防止生物传染危险物的逸出B防止扩增产物从该区进入上游区域C防止该区灰尘的逸出D无特殊目的4核酸探针的标志性特征是:(DA一小段已知序列的单链核酸B一小段未知序列的单链核有同位素或非同位

2、素标记物5核酸提取纯化中, Rnase最主要的潜在污染源是:(D)A实验室环境B实验用品如吸头、离心管等C实验人员的手D以上A和B6PCR方法检测病原微生物所扩增的区段,一般为:(B)A整个病原体基因组B病原体基因组内的保守区域C病原体基因组内的任一区域D以上都不是7无创产前基因诊断为胎儿做出基因检测,需从孕妇外周血中分离获取及少量的:(B)A孕妇有核红细胞B胎儿有核红细胞C白细胞D以上均可8.临床PCR测定的重复性不好的原因如下,但除外:(BA试剂盒核酸提取方法对扩增抑制物去除不干净B标准品浓度不准C核酸扩增仪空间温度不均D加样重复性差9有关于动力学定量PCR方法中对扩增效率的测定,下述哪一

3、条是错误的:(BA必须在扩增的指数期内测定B可在扩增的任何阶段进行C与扩增产物的测定有关D尽可能多选几个测定点10.临床基因扩增检验的室内质量控制与通常的临床定性免疫测定IQC的最大不同在于:(D)A弱阳性质控血清的设置B强阳性质控血清的设置C阴性质控血清的设置D以上均是11、PCR技术扩增DNA,需要的条件是( A ) 目的基因引物四种脱氧核苷酸DNA聚合酶等mRNA 核糖体A、 B、 C、 D、12、镁离子在DNA或RNA体外扩增反应的浓度一般为（ D ）A、0.3-1mmol/L B、0.5-1mmol/L C、0.3-2mmol/L D、0.5-2mmol/L 13、多重PCR需要的引

4、物对为（ D）A、一对引物 B、半对引物 C、两对引物 D、多对引物14、PCR是在引物、模板和4种脱氧核糖核苷酸存在的条件下依赖于DNA聚合酶的酶促合成反应，其特异性决定因素为（ B）A、模板 B、引物 C、dNTP D、镁离子15、在PCR反应中，下列哪项可以引起非靶序列的扩增的扩增( C ) A、TaqDNA聚合酶加量过多 B、引物加量过多C、A、B都可 D、缓冲液中镁离子含量过高16、PCR技术的发明人是（A ）A、 Mullis B、史蒂文.沙夫 C、兰德尔.才木 17、PCR产物短期存放可在（ A ）保存。A、4 B、常温 C、-80 D、高温18、PCR产物长期储存最好置于（ D

5、 ）。A、4 B、常温 C、16 D、-2019、PCR的基本反应过程包括（A ）A、 变性、退火、延伸 B、变性、延伸 C、变性、退火 20、在实际工作中，基因扩增实验室污染类型包括(D)A、 扩增产物的污染 B、天然基因组DNA的污染 C、试剂污染和标本间交叉污染D、A、B、C都可能21、PCR技术于哪一年发明（ A ）A、1983 B、1971 C、 1987 D、199322、Taq DNA聚合酶酶促反应最快最适温度为（C ）A、37 B、50-55 C、70-75 D、80-8523、以下哪种物质在PCR反应中不需要（ D ）A、 Taq DNA聚合酶 B、dNTPs C、镁离子 D

6、、RNA酶24、PCR检测中，经过n个循环的扩增，拷贝数将增加（ C ）A、 n B、2n C、2n D、n225、PCR基因扩增仪最关键的部分是（ A ）A、 温度控制系统 B、荧光检测系统 C、软件系统 D、热盖26、以下哪项不是临床PCR实验室设计的一般原则（ A ）A、 各区合并 B、注意风向 C、因地制宜 D、方便工作27、PCR实验室一般包括( D )A、 试剂准备区B、标本制备区 C、扩增区和产物分析区 D、A、B、C都含28、PCR技术不仅为遗传病的诊断带来了便利，而且改进了检测细菌和病毒的方法。若要检测一个人是否感染了艾滋病病毒，你认为可以用PCR扩增血液中的（D）。A、 白

7、细胞DNA B、病毒蛋白质 C、血浆抗体 D、病毒核酸29、如果反应体系中加入模板DNA分子100个，则经过30个循环后，DNA分子的数量将达到（ D ）个。A、10030 B、100302 C、100302 D、10023030、PCR扩增产物的分析方法主要有（ D ） A、凝胶电泳分析法 B、点杂交法 C、荧光探针定量PCR法 D、A、B、C都是二、判断题（共20题，每题2分）1、PCR引物设计的目的是在扩增特异性和扩增效率间间取得平衡。（ ）2、在PCR反应中，dATP在DNA扩增中可以提供能量，同时作为DNA合成的原料。（ ）3、DNA扩增过程未加解旋酶，可以通过先适当加温的方法破坏氢

8、键，使模板DNA解旋。（ ）4、PCR反应中，复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成。（ ）5、PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高。（ ）6、PCR技术可用于基因诊断，判断亲缘关系等。（ ）7、PCR技术需在体内进行。（）8、PCR反应体系中的缓冲液相当于细胞中的体液。（）9、核酸的复制是由5 3方向进行的。（）10、配对的碱基总是A与T和G与C。（）11、HBsAg转阴性后一段时间才出现可检测的HBsAb，此段间隔期称之为“窗口期”。（）12、市面上多数试剂用淬灭基团Q基团和报告基团R基团来标记荧光定量PCR的探针。（）13、PCR反应体系中Mg2+的作

9、用是促进Taq DNA聚合酶活性。（）14、若标本中含有蛋白变性剂（如甲醛），PH、离子强度、Mg2+等有较大改变都会影响Taq酶活性。（）15、 每个子代DNA分子中均保留一条亲代DNA链和一条新合成的DNA链，这种复制方式称之为半保留复制。（）16、 发生溶血的标本对PCR结果没影响。（）17、 “平台效应”是描述PCR后期循环产物对数累积趋于饱和。（）18、 逆转录聚合酶链式反应（reverse transcription-PCR，RT-PCR）就是在应用PCR方法检测RNA病毒时，以RNA为模板，在逆转录酶的作用下形成cDNA链，然后以cDNA为模板进行正常的PCR循环扩增。（）19、

10、 在定量PCR中，72这一步对荧光探针的结合有影响，故去除，实际上55仍可充分延伸，完成扩增复制。（）20、 PCR可应用于遗传病、肿瘤及病原体检测三大方面（）三、 简答(共两题，每题10分)1、 PCR技术答：PCR技术是用一对寡聚核苷酸作为引物（要点1：2分），通过高温变性、低温退火、中温延伸（要点2：5分）这一周期的多次循环，使特异的DNA片段数量指数倍数增加（要点3：3分）。2、简述定量PCR检测操作的全过程。答：标本的采集，保存（2分）样品前处理（2分）待样品充分裂解后点样上机反应（2分）反应结束后观察结果（2分）发报告（2分）历年考试高频题目一.填空（每空0.5分，共15分）1.

11、为加强医疗机构临床基因扩增实验室规范化管理，卫生部于2010年发布医疗机构临床基因扩增实验室管理办法 ，北京市卫生局为做好实验室备案工作，于2012年发布了北京市医疗机构临床基因扩增检验实验室技术审核暂行规定。（2019）2. 北京市卫生局及各区县卫生局负责所辖行政区域内地方医疗机构临床基因扩增检验实验室的备案和监督管理工作。其中备案的技术审核工作流程主要包括：申报、资料审核、现场验收、整改、通知实验室资料审核结果。医疗机构的医学检验科应当设有临床细胞分子遗传学专业诊疗科目。备案的临床基因扩增检验实验室参加医疗机构的年度校验。（2019）3. 临床基因扩增检测的分析中质量保证关键内容包括：室内

12、质控和室间质评。其中前者监测和控制的是实验室测定的重复性，而后者则通过对不同的实验室测定结果的比对而评价实验室测定的准确度。（2019）4. DNA双螺旋结构的特点是：螺旋中的两条链为反向平行，其中一条链的方向为5-3，另一条链的方向为3-5。（2019）5. 核酸包括两种类型：脱氧核糖核酸和核糖核酸，二者的主要区别为：前者由ATCG四种碱基组成，而后者由AUCG四种碱基组成。（2019）6. 根据遗传中心法则，遗传信息的流动方向为DNARNA蛋白质。（2019）7. 普通临床基因扩增检验实验室一般包括下面四个分区：试剂储存和准备区、标本制备区、扩增区、扩增产物分析区。（2019）8. 提纯的

13、核酸样品可根据OD260波长的光吸收值算出其含量，通过计算260/280的比值计算出其纯度。（2019）9. 临床基因扩增实验室检测用的试剂应当经国家药监局批准。（2019）10. cfDNA的和中文名称是细胞游离DNA，ctDNA的中文名称是循环肿瘤DNA。（2019）11. 在PCR前，为保护操作者和样本，手工处理样本应该在样本制备区的生物安全柜中进行，并使用带滤芯的移液吸头进行样本操作。（2020）12. 医疗废物垃圾袋结扎采用“鹅口颈”套扎结扎形式。（2020）13. 锐器盒容积达到总体积的3/4时需要更换。（2020）14. 核酸检测中，全血样本采集一般使用EDTA或枸橼酸盐抗凝，不

14、使用肝素抗凝。（2020）15. 荧光定量PCR使用的Taqman探针两端标记有报告荧光R 5基团和荧光 粹灭Q 3基团。（2020）16. 新冠病毒核酸检测应该在生物安全级实验室开展，同时采用生物安全级实验室的个人防护。（2020）17. PCR的基本反应过程包括变性、退火、延伸。（2020）18. DNA/RNA的紫外吸收在260nm附近有最大吸收值。（2020）19. 核酸的基本结构单位是：核苷酸，其组成包括碱基、核糖或脱氧核糖和磷酸。（2020）二是非题（在你认为正确的句子后面打，错误的后面打，每题1分，共15分）1.DNA双链中，碱基A-T之间以三个氢键相连，G-C以两个氢键相连。 （）（2019）2.与细胞学初筛相比较，HPV核酸检测初筛具有更高的敏感性。 （）（2019）3.使用有防“污染”作用的尿苷糖基酶（UNG）的PCR试剂盒，该酶可以降解含有UTP的扩增产物。 （）（2019）4.DNA变性是指在物理或化学因素的作用下，导