原来科学家们发现，有很多酶都可以降解actin（由于不同actin亚型序列差别不大，所以下面统称actin。这一系列酶的种类多得超乎你想象！

除了这些酶的作用，在有些特殊的刺激下，比如凋亡，actin也会降解！

咱们熟悉的42 kDa的actin，发生降解后会产生35-38 kDa、~30 kDa, 15 kDa等典型片段来，其中35-38 kDa的片段最为常见，这是因为不少酶都会在Val43和Met44这两个氨基酸中间切开它，也就是下面这个意思：

综上所述，如果actin出现多条带，建议从以下几个方面考虑解决：

1. 像上面提及的凝血酶、组织蛋白酶等在各组织里和细胞里的分布比较广泛，在裂解过程中它们极有可能是降解actin的主要因素，因此需要设法 抑制蛋白酶活性，比如引入蛋白酶抑制剂、避开蛋白酶最适活性温度等；

2. 对于贴壁细胞，在传代过程中使用的胰酶也是一个潜在威胁，在传代的时候需要控制好消化时间，防止消化过度，尤其是在最后一次传代时，细胞密度尽量传低，以充份稀释残留的胰酶，同时提高未被降解的细胞的比例。

3. 保持细胞处于良好的状态，防止发生凋亡。对于研究凋亡的童鞋来说，可以考虑用其它内参。

4. 防止细胞被微生物污染、防止裂解产物被微生物污染，提蛋白的全部器皿尽可能干净无微生物污染。（关于提取蛋白的更多细节建议参考我们关于蛋白抽样的推文 ）

但是，针对富含大量蛋白酶的组织（如消化系统组织）和细胞（如U-937, Raw264.7等细胞），即使用了上述方法，依然有较大可能出现actin被降解的可能。那怎么办？

不用担心，Proteintech已经完美解决这一问题！

我们来看看Proteintech的两支 β-actin单抗：

所以，当实在无法解决beta-actin出现降解条带但又需要漂亮图图的， 如果确认目的蛋白不受降解影响或影响极小的，可以考虑采用Proteintech 的66009-1-Ig来解决。

为了方便大家选择产品，我们顺便把这两个产品的对比列出来：

（注意：60008-1-Ig亚型为IgM，不适合做IP实验。）

怎么样，WB要重做的理由又被K.O了一个，有木有很开心？

~ 彩蛋来袭~

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