正在做或准备接触 Western blot 实验的同学可以认真阅读这篇文章，实操每一步做什么、怎么做、要注意什么都写的非常详细，包括会遇到的实验问题也写了非常详细的解决方案。

我走过的弯路大家就不要再走了，祝大家实验顺利！

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WB，是Western blotting的缩写，即蛋白质印迹法，又称免疫印迹（immunoblotting）,也就通过电泳技术分离不同组分，再采用印迹技术将蛋白质转移（“印”）到特定的膜上，再利用抗原-抗体的特异性结合原理，用抗体作为探针去实现检测复杂样品中的靶标蛋白的方法，这项技术也可以用来检测不同时期蛋白表达的水平以及蛋白相互作用等方面。

实验原理和用途

原理：通过电泳区分不同的蛋白组分，并转移至固相支持物，通过特异性抗体作为探针，对靶蛋白进行检测。

用途：定性检测，判断目标蛋白有无表达，目标蛋白分子量大小。常配合ELISA、FACS、IHC、IF等手段使用。

样本制备→凝胶电泳→蛋白转膜→封闭→抗体孵育→检测显影