对于浸没在液体中或嵌入聚合物中的样品/样本，由于球差会妨碍高质量的显微镜观察。空气与样品的液体或包埋介质之间的折射率不匹配是导致像差导致图像失真的原因。像差可能导致难以准确观察样品的某些特征。对于使用光学显微镜（立体或复合）观察浸没或嵌入样品的用户而言，可以校正折射率失配的物镜可以使球像差大大降低且焦点更清晰。

体视显微镜的一个缺点是，变得难以观察和记录未直接暴露于空气中的样品/样本，例如，嵌入聚合物（例如电子元件）或浸入液体（例如水生生物）。当观察浸入水溶液中的样品时，样品的精细结构和特征会显得模糊，尤其是在高放大倍数下。

这种模糊或图像失真是由于球差引起的。像差是由空气（n = 1）和水（n = 1.3）的折射率差异引起的，称为折射率失配。由于体视显微镜的“正常物镜”可能会发生球面像差，因此有趣或重要的结构很容易被遗漏或忽略，而立体镜针对直接暴露在空气中（没有浸没或嵌入介质）的样品进行了优化。对于使用“ z-stacking”软件功能创建的3D合成图像，像差特别明显，因为结构在z方向上看起来很细长。

对于复合显微镜，也会发生相同的现象，但是有液体浸没物镜可以与镜片和样品之间的液体层一起使用。通常，浸没液体是水或油，它们有助于显着降低上述图像像差。

用于体视显微镜的Leica Plan Apo 2x物镜于2010年推出。由于有效数值孔径为0.35，因此实现了1,050线对/ mm（可见光952 nm）的分辨率。与早期的显微镜系统相比，这种分辨率的提高部分归功于FusionOptics。FusionOptics技术利用非对称变焦镜头，为体视显微镜用户（通过目镜）提供了对所观察样品的良好3D感知，并具有高分辨率和相应的景深。不幸的是，当使用Plan Apo 2x物镜对沉浸式或嵌入式媒体进行成像时，可能会出现球差问题。

对作为斑马鱼等脊椎动物胚胎发育的模型系统的水生生物的研究仍然产生了对更高分辨力，更好的透光率和更好的信噪比（S / N）性能的需求。对于具有体视显微镜的荧光应用而言，这一需求尤其如此。当使用针对暴露于空气中的样品进行了优化的高分辨率物镜时，在次优条件下观察并记录了明显嵌入和浸入的样品以及带有盖玻片的样品。

显微镜物镜带有“校正环”，可以调节透镜浸入介质与样品浸入或嵌入介质之间的折射率不匹配。对校正环的调整会导致物镜内一组透镜的位置发生偏移。图1显示了物镜环如何校正折射率失配的图示。

物镜的校正轴环使用户可以消除球差，并获得嵌入式（聚合物或玻璃）或液浸（水）样品/样本的图像，焦点更清晰，更清晰。在校正了与物镜环的折射率不匹配之后，似乎没有浸入或嵌入介质。正确调整物镜校正环既可以改善空间分辨率，又可以改善图像的信噪比。

带有校正环的体视显微镜物镜的一个例子是Leica Plan Apo 2x Corr物镜。使用Leica Plan Apo 2x Corr，即使厚的嵌入式样品或浸入深水溶液（5 mm）中的样品也可以成像，而几乎没有像差。 

图1：用显微镜观察浸没或嵌入的样品/样本；通过光学系统追踪光线（黄色）（蓝色虚线是光轴）。–未经校正的情况：样品浸入/嵌入介质与空气之间的折射率不匹配会导致球差和沿垂直方向的图像伸长。–校正后的情况：能够调整折射率不匹配的物镜可以在很大程度上消除像差。

许多用户使用体视显微镜检查或记录嵌入的和液浸的样品/标本。以下示例说明了将体视显微镜与Leica 2x Plan Apo Corr物镜一起使用时的图像质量得到改善（假设正确设置和调整）。

牛肺动脉内皮细胞（BPAE）被用作研究心血管功能和疾病的模型系统。使用荧光FluoCells牛肺动脉内皮（BPAE）图像细胞，MitoTracker®红，CMXRos，BODIPY® FL phallacidin和DAPI（分子探针，莱顿，荷兰）在图2中看到他们用获得的徕卡M205 FA体视显微镜，Leica 2x Plan Apo物镜或Leica 2x Plan Apo Corr物镜，Leica DFC3000G数码相机和LAS X软件。

在图2A中，仅带有鬼笔环肽通道的荧光图像和用Leica 2x Plan Apo物镜（无校正环）捕获的明场图像。该BODIPY® FL phallacidin污渍选择性的F-肌动蛋白丝。获取图像Z堆栈，并显示每个堆栈的高清晰图像。没有应用任何图像处理算法，因此这些图像显示原始数据。

在图2B中，图像是使用Leica 2x Plan Apo Corr物镜捕获的，其中校正轴环设置为0.25 mm，以补偿嵌入介质和盖玻片。通过肉眼观察和比较在稍微不同的设置下使用校正环获得的Z堆栈序列，可以确定校正环的恰当位置。图像清楚地显示出校正环上正确设置对图像质量的影响。细胞中的肌动蛋白丝结构变得更加明显，信噪比得到改善。与大多数类型相比，BPAE细胞样品非常薄。

图2：A：BPAE细胞的荧光图像嵌入有盖玻片的载玻片上，并用Leica M205 FA体视显微镜捕获，其中使用了2x Plan Apo物镜，没有校正环。细胞中的肌动蛋白丝（红色箭头）可见，但显得模糊。单元格的边界处也有轻微的模糊（白色箭头）。B：使用带有校正环的Leica 2x Plan Apo Corr物镜的相同样品。肌动蛋白丝（红色箭头）变得更加可见。单元边界处的模糊（白色箭头）显着减少。原子核中的结构可以更好地解析。

用较厚的样品可以看到更大的效果，例如将斑马鱼的幼虫浸入水溶液中，深度可达几毫米。下面的视频（图3）是使用Leica M165 FC体视显微镜，Leica 2x Plan Apo物镜或Leica 2x Plan Apo Corr物镜以及Hamamatsu Orca-R2数码相机获得的。斑马鱼的幼虫在其血管中表达绿色荧光蛋白（GFP）。

图3：表达绿色荧光蛋白（GFP）的斑马鱼幼虫的荧光视频图像，浸没在水溶液中。图像是使用Leica M165 FC体视显微镜拍摄的，其中使用了Leica 2x Plan Apo物镜，带（右图）和不带（左图）校正环。在两个视频中都可以看到斑马鱼幼虫的心脏跳动。幼虫在右侧的未校正图像中显得模糊。由德国明斯特的马克斯·普朗克分子生物医学研究所血管生成实验室M. J. Hamm和W. Herzog和德国明斯特的WestfälischeWilhelms大学提供。

商业上出售的发光二极管倾向于被嵌入聚合物中以用于实际用途。嵌入聚合物中的LED的图像如图4所示。它们是使用Leica M205 FA体视显微镜，Leica 2x Plan Apo物镜或Leica 2x Plan Apo Corr物镜，DFC450数码相机和LAS X软件获取的。

在图4A中，使用Leica 2x Plan Apo物镜（没有校正环）捕获的明场图像。可以看到LED的各个部分。获取图像Z堆栈，并显示每个堆栈的高清晰图像。没有应用任何图像处理算法，因此这些图像显示原始数据。

在图4B中，使用Leica 2x Plan Apo Corr物镜捕获图像，其中校正轴环设置为2 mm以补偿塑料。和以前一样，通过视觉观察和比较在稍微不同的设置下用校正环获得的Z堆栈序列来确定校正环的恰当位置。可以看到图像质量的明显差异。LED段的焦点更加清晰，信噪比得到改善。

图4：A：用Leica M205 FA体视显微镜捕获的嵌入聚合物中的LED的明场图像，其中使用了没有校正环的Leica 2x Plan Apo物镜。各个LED片段可见，但模糊。B：使用带有校正环的Leica 2x Plan Apo Corr物镜的相同样品。现在，LED细分更加清晰。明显减少了模糊。

由于空气与样品或样本的液体或包埋介质（例如聚合物）之间的折射率不匹配而引起的球差会降低显微镜观察的质量。在观察过程中，样品的特定特征可能会失真。光学显微镜（立体或复合）用户通过观察浸入或嵌入的样品，可以通过使用可校正折射率失配的物镜来避免像差和图像失真。