一、培养基用途

  用于生活饮用水及其水源水中粪大肠菌群测定。

二、试验原理

  胰蛋白胨、多价蛋白胨和酵母粉提供氮源、维生素和生长因子；氯化钠维持均衡的渗透压；乳糖为可发酵糖类；3号胆盐抑制革兰氏阳性菌；琼脂是培养基的凝固剂；苯胺蓝和玫红酸为pH指示剂。

  粪大肠菌群可在44.5℃条件下分解乳糖产酸，使培养基pH下降，菌落为亮蓝色，其他不发酵乳糖的肠道菌菌落为无色、灰色或淡红色。

三、培养基配方（g/L）

多价蛋白胨

5.0

胰蛋白胨

10.0

乳糖

12.5

酵母粉

3.0

三号胆盐

1.5

氯化钠

5.0

苯胺蓝

0.2

琼脂

15.0

玫红酸

0.1

四、试验方法

  1.称取本品52.3g，加热煮沸溶解于1000ml蒸馏水中，冷却至45-50℃左右时，倾入无菌平皿，备用。无需高压灭菌。

  2.制备好的平板保存于2-8℃，应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴暗干燥处，室温保存。

  3.使用前，把制备好的平板放置室温10-20分钟。

  4.制备质控菌液。选择合适稀释度的质控菌液0.1ml，均匀涂布于待测平板以及参比平板上，每一稀释度接种两个平板。

  5.用1μL接种环取非目标菌质控菌液1环，将接种环接触容器边缘3次，去除多余液体，在平板表面划六条平行直线，同时接种两个平板。

  6.44.5℃倒置培养基培养24±2小时，记录实验结果。

五、结果观察与解释

  接种以下质控菌株，44.5℃倒置培养基培养24±2小时：

质控菌株

菌株编号

接种量(CFU)

参比或计数培养基

方法

质控评定标准

其他特征

大肠埃希氏菌

ATCC25922

20-200

TSA

定量

PR≥0.7

蓝色菌落

鼠伤寒沙门氏菌

ATCC14028

20-200

PR≥0.7

无色菌落

福氏志贺氏菌

ATCC12022

20-200

PR≥0.7

无色菌落

产气肠杆菌

ATCC13048

20-200

PR≥0.7

灰色菌落

金黄色葡萄球菌

ATCC25923

/

/

半定量

G≤1

/

  MFC琼脂微生物质控结果：

大肠埃希氏菌

蓝色菌落

鼠伤寒沙门氏菌

无色菌落

福氏志贺氏菌

无色菌落

产气肠杆菌

灰色菌落

金黄色葡萄球菌

抑制

六、注意事项

  本培养基仅为细菌鉴定的一部分，需做其他补充试验。

  注：本文属海博生物原创，未经允许不得转载。

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