NCBI SRA数据库使用详解

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NCBI SRA数据库使用详解

2024-07-16 20:09| 来源: 网络整理| 查看: 265

1、简介

SRA(Sequence ReadArchive)数据库是用于存储二代测序的原始数据,包括 454,Illumina,SOLiD,IonTorrent,Helicos 和 CompleteGenomics。除了原始序列数据外,SRA现在也存在raw reads在参考基因的比对信息。

根据SRA数据产生的特点,将SRA数据分为四类:

Studies-- 研究课题

Experiments-- 实验设计

Runs-- 测序结果集

Samples-- 样品信息

SRA中数据结构的层次关系为:Studies->Experiments->Samples->Runs.

Studies是就实验目标而言的,一个study 可能包含多个Experiment。

Experiments包含了Sample、DNA source、测序平台、数据处理等信息。

一个Experiment可能包含一个或多个runs。

Runs 表示测序仪运行所产生的reads。

SRA数据库用不同的前缀加以区分:

ERP或SRP表示Studies;

SRS 表示 Samples;

SRX 表示 Experiments;

SRR 表示 Runs;

biocc_5742f05e_00f7_43a3_aa13_e8d87d408c

Figure1.SRA数据库收录数据增长曲线

2、使用

biocc_441e0084_3dba_403c_871a_2af41486afFigure2:搜索相关研究的疾病,选择相应数据集

biocc_6affa04c_3c29_466c_a18f_24498f8d3cFigure3:点击第一个案例进入详细信息界面

biocc_25246898_49b4_41be_b3ce_49b85e1c24 Figure4:Study详细信息页面

biocc_f86305ea_4956_4a06_ba8b_4f00119967 Figure4:Experiments详细信息页面

biocc_0c2008a8_627d_4453_b932_235fb7faeb Figure4:Runs详细信息页面,选择要下载的Runs

3、下载数据

要下载SRA数据,我们需要先安装SRA Toolkit软件包,下载地址:

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/Traces/sra/sra.cgi?view=software

根据自己的环境下载相应的软件包。

主要包括:

CentOS 32/64

Ubuntu 32/64

MacOS 32/64

MS Windows 32/64

以CentOS为例:

1、下载安装:

wget "http://ftp-trace.ncbi.nlm.nih.gov/sra/sdk/current/sratoolkit.current-centos_linux64.tar.gz"

tar xzf sratoolkit.current-centos_linux64.tar.gz

2、运行下载

cd sratoolkit.2.5.7-centos_linux64/bin

./prefetch SRR2172038

下载完成后,会在你的工作主目录下生成一个ncbi的文件夹。

cd ncbi/public/sra

查看SRR2172038.sra数据

3、转换fastq

/sratoolkit.2.5.7-centos_linux64/bin/fastq-dump ./SRR2172038.sra

4、转换fasta

/sratoolkit.2.5.7-centos_linux64/bin/fastq-dump  --fasta ./SRR2172038.sra

4、数据提交

一个 SRA study 所包含的内容, 应该在一个 LSBI 的项目中提交。 即 SRA study 和 LSBI项目为 1 对 1 关系。 一个 study 的内容可以在一个项目下, 分成几个批次提交, 每次提交不同的内容。

一个批次的 SRA 数据, 包括一个.info 文件和一个名为 DATA, 装有提交原始文件的子文件夹。 子文件夹中内容为描述 metadata 的 xml 文件或者 sff 等格式的数据文件。 一个完整的 study, 包括一个或多个 study.xml, experiment.xml, sample.xml 和 run.xml, 以及一个或多个数据文件。 但是一个批次的提交数据不一定包括所有的文件。

Run.xml 和该 xml 中包括的所有数据文件, 必须要在一个批次中提交。

请先确认您已是数据中心网站注册的用户, 否则请登陆中心网站,注册。

登陆中心网站后,点击左侧菜单的 mydata,选择已有项目或创建新项目。

选择已有批次或创建新批次。 在创建批次时, 选择要提交的数据类型为“SRA”。

在点击批次下的 submit data 按钮后, 进入提交页面。

首先下载离线提交附件( subdesc.bch), 作为离线提交的标识文件, 是离线提交必须的附件之一。

按照 SRA 的数据格式标准, 处理生成数据文件, 连同标识文件一起, 通过提交页面上显示的路径( 为 ftp://shengxin.ren:1221/SRA/****/) 上传至服务器指定目录。



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