之邯郸勺丸创作

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电泳的基来源根基理及浓缩胶浓缩样品的原理

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（十二烷基硫酸钠

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聚丙烯酰胺凝胶电泳）是目前最经常使用

的分离蛋白质的电泳技术

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聚丙烯酰胺凝胶电泳，是在聚丙烯

酰胺凝胶系统中引进

SDS

，

 SDS

能断裂分子内和分子间氢键，破

坏蛋白质的二级和三级结构，强还原剂能使半胱氨酸之间的二硫

键断裂，蛋白质在一定浓度的含有强还原剂的

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溶液中，与

SDS

分子按比例结合，形成带负电荷的

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蛋白质复合物，这种

复合物由于结合大量的

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，使蛋白质丧失了原有的电荷状态形

成仅坚持原有分子大小为特征的负离子团块，从而降低或消除了

各种蛋白质分子之间天然的电荷差别，由于

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与蛋白质的结合

是按重量成比例的，因此在进行电泳时，蛋白质分子的迁移速度

取决于分子大小。当分子量在

15KD

到

200KD

之间时，蛋白质的迁

移率和分子量的对数呈线性关系，符合下式：

logMW=K-bX

，式

中：

MW

为分子量，

X

为迁移率，

k

、

b

均为常数，若将已知分子量

的尺度蛋白质的迁移率对分子量对数作图，可获得一条尺度曲

线，未知蛋白质在相同条件下进行电泳，根据它的电泳迁移率即

可在尺度曲线上求得分子量。

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电泳成功的关键是什么？

①溶液中

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单体的浓度

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在水溶液中是以单体和

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多

肽胶束的混合形式存在，能与蛋白质分子结合的是单体。为了包

管蛋白质与

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的充分结合，它们的重量比应该为

1

∶

4

或

1

∶

3

。

②样品缓冲液的离子强度

因为

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结合到蛋白质上的量