PAS糖原染色实验原理与步骤 |
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PAS糖原染色实验原理与步骤 ![]() 来源/作者:普拉特泽-病理染色技术平台 ![]() ![]() ![]() 一、PAS糖原染色实验简介与原理 实验简介:PAS染色又称过碘酸雪夫染色,糖原染色。一般用来显示糖元和其它多糖物质。 实验原理:糖原染色是病理学中常规的染色方法之一,氧化剂能氧化糖类及有关物质中的1,2-乙二醇基,使之变为二醛,醛与Schiff试剂能结合成一种品红化合物,产生紫红色。PAS技术常用来显示糖原和其他多糖,该染色液不仅能够显示糖原,还能显示中性黏液性物质和某些酸性物质,以及软骨、垂体、霉菌、真菌、色素、淀粉样物质、基底膜等。
二、PAS糖原染色临床意义 随着医学实验技术的发展,近年来,糖原染色应用的范围更加广泛,如用以证明与鉴别细胞内空泡状的性质,心肌病变及其他心血管疾病的诊断,糖原累积病诊断和研究,糖尿病的诊断和研究,用于某些肿瘤的诊断等。除用于糖原的鉴定和黏液的显示外,还可以观察肾小球基底膜、结肠杯状细胞中性黏液物质、阿米巴滋养体和霉菌的着色。为临床诊断、分类和治疗提供了重要的依据。
三、PAS糖原染色实验步骤(样本与实验目的不同步骤均有不同) step1:固定新鲜干燥的涂片用品5%乙醇固定10min,蒸馏水冲洗,待干 Step2:如涂片需要消化,可加唾液或麦芽糖淀酶,置室温消化60min,然后用蒸馏水冲洗 Step3:10g/L高碘酸氧化15~20min,蒸馏水冲洗,待干 Step4:置雪夫染液中室温染色30~60min Step5:用亚硫酸溶液冲洗3次后,再用自来水冲洗2~3min,待干 Step6:蒸馏水洗。 Step7:20g儿甲绿复染10~20min Step8:水洗,待干,镜检拍照
四、PAS糖原染色常见问题分析及原因解析 1、染色过深或过浅 染色时间、分化时间过长或不够,染色过程可在镜下控制,适当调整时间。 2、切片染色不均 取材固定不当,取材规范标准:固定彻底; 脱水不够,重新脱水、透明、浸蜡。 3、 切片染色模糊不清 包埋蜡温度过高; 脱水透明不彻底。 上一篇: Masson染色实验原理与步骤下一篇: TTC染色实验步骤与注意事项 |
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