小鼠骨髓、脾脏、小肠、肺、皮肤的DC/单核/巨噬设门步骤

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小鼠骨髓、脾脏、小肠、肺、皮肤的DC/单核/巨噬设门步骤

2023-09-09 13:31| 来源: 网络整理| 查看: 265

原标题:小鼠骨髓、脾脏、小肠、肺、皮肤的DC/单核/巨噬设门步骤

流式中文网注:最近论坛上问小鼠巨噬细胞的问题比较多,故将去年发的这篇再发一次,并附上当时两份精彩留言

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小鼠DC目前分为经典DC(cDC)和浆细胞样DC(pDC),cDC进一步细分为cDC1(淋巴组织中为CD11b- CD8 +或非淋巴组织中为CD11b- CD103 +)或cDC2(CD8 / CD103- CD11b +SIRPα+细胞)。尽管所有cDC在整个组织中均表达高水平的CD11c和MHCII,但pDC却是CD11c int细胞,其特征性表达诸如SiglecH、B220和mPDCA-1的标记,而缺乏CD11b的表达,甚至最近的一些研究认为pDC可能是淋系来源的。

朗格汉斯细胞(LC)是表皮特异性抗原呈递细胞,由于它们表达CD11c、CD11b和MHCII并显示迁移至淋巴器官,因此最初被归类为DC家族成员。然而,LCs显示出更多来自胎儿巨噬细胞来源,因此,这些细胞现在已被归类为表皮中的常驻巨噬细胞。

单核细胞也是异质的,已被分为两个亚群:炎性CXCR1hi CCR2-CD62L-CD43hi Ly6Clo和巡逻CX3CR1int CCR2+ CD62L+ CD43lo Ly6Chi单核细胞。稳定状态下募集到组织中的Ly6Chi MHCIIlo单核细胞连续分化为Ly6Clo MHCIIhi巨噬细胞,一种现象称为单核细胞到巨噬细胞的“瀑布现象”,主要存在于肠道和皮肤中。

下面依次是为方便大家理解,我在图上做了标注,不过相同的思路不重复标注,所以请务必从头到尾逐一看下去:

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精选留言:

「墨白」站友:我分的是小鼠下腔静脉结扎后血栓里的巨噬细胞分型,根据自己的经验,我认为CD45+CD11b+/-+F4/80+是巨噬细胞,其中不用强调CD11b的阳性,它更是一个单核细胞的标志。当然我困惑,我用F4/80+CD11c+分M1F4/80+CD206+分M2一直得不到好看的分群,看过这篇总结后我感觉我可以尝试它们各自的功能标志,如iNOS IL4r。

「tan」站友:我自己做分的很好,只不过206跟iNOS是大概的分,不可能像TB细胞那样得到非常完美的群,巨噬细胞的抗体有待寻找更好的标志

「墨白」站友:我分的是小鼠下腔静脉结扎后血栓里的巨噬细胞分型,根据自己的经验,我认为CD45+CD11b+/-+F4/80+是巨噬细胞,其中不用强调CD11b的阳性,它更是一个单核细胞的标志。当然我困惑,我用F4/80+CD11c+分M1F4/80+CD206+分M2一直得不到好看的分群,看过这篇总结后我感觉我可以尝试它们各自的功能标志,如iNOS IL4r。

「tan」站友:我自己做分的很好,只不过206跟iNOS是大概的分,不可能像TB细胞那样得到非常完美的群,巨噬细胞的抗体有待寻找更好的标志

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