尽量不要用来路不清或基本被淘汰很少人在使用的系统，从文献和我们多年的实践可以结论，这类系统是稳定的，因而分析原因时尽量少花精力在对载体系统的验证上，这样会白花力气。

    五、操作控制细节规范严谨

    至于包装转染时的操作控制细节及其转染试剂因素，只要在操作时按相关使用说明和操作步骤，应该没有大问题，所以也不要白花太多精力在这上面。

    六、排查构建缺失或污染因素

    重点关注和排查的因素就是目的基因的表达载体构建和抽提纯化环节，是否构建时导致质粒载体重组或某个部件缺失，或污染别的质粒或杂物中抽提纯化是否污染? 是否抽提的是别的质粒?

要养成同时做阴性对照的习惯（是否目的基因载体和阴性对照 GFP 载体是同一批，建议同一批，建议每次包装都如此操作），如果这个环节没有啥问题，在构建中出现重组和缺失、或抽提纯化失败的可能性也不大。

    七、概率极低最后的尝试

    落实了上面那些因素，那就是最后一个原因。目的基因的大小、序列情况、该目的蛋白的功能毒性等导致无法包装成功（实践中，这种情况是有的，我们偶尔会遇到，可能原因是一些基因表达翻译后对包装细胞产生毒性，导致细胞状态异常）。

那么我们能做的就是换病毒包装载体系统，尝试其他载体系统能否包装出来。不过这种情况出现的几率非常低，你做上 100 个基因，也可能碰不上一个。

因而总的来说，我们进行病毒包装实验时要重视包装材料——细胞及表达质粒（对拿过来的细胞和载体系统要验证，常出现包装细胞、空表达载体质粒就有问题，我们要定期纯化生产包装细胞、空表达载体质粒）。

    细胞培养时让它「白白胖胖、活力充沛」，目的基因的表达载体构建纯化良好，质粒间比例得当，病毒包装实验还是能有较好的结果。

    基因云联合生化细胞所苏州研究院开展病毒包装服务，根据客户提供的基因信息，从苏州研究院CCRB资源库中筛选合适的质粒，通过基因重组技术构建慢病毒表达载体（或由客户提供），经过包装、纯化和检测等操作流程生产出符合客户需求的病毒颗粒，用于科研和临床前感染细胞或者动物实验。服务优势    平台优势：苏州研究院与各大科研院所、企事业单位合作，建立了强大的质粒、细胞资源库，拥有从生产到质量检测的全流程技术，严格的质量管理体系和高素质的研发人才队伍，采用世界领先的科研设备与设施以及信息化管理系统，进行AABB、cGMP、ISO17025:2017等质量管理体系认证。返回搜狐，查看更多