PCR扩增分离目的DNA片段实验原理、材料和步骤

一、目的了解多聚合酶链反应DNA 扩增技术的基本原理和实验应用，掌握PCR反应基本技术。二、原理PCR（Polymerase Chain Reaction）即聚合酶链式反应是1986 年由Kallis Mullis 发现。这项技术已广泛地应用于分子生物学各个领域，它不仅可用于基因分离克隆和核酸序列分析，还可用于突变体和重组体的构建，基因表达调控的研究，基因多态性的分析，遗传病和传染病诊断，肿瘤机制 ...

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何谓正义引物和反义引物？

我不是高手，但是试着回答一下。上游引物和下游引物是按照位置来分的。与mRNA相同的引物为正义引物，而与其互补的是反义引物。所以上游引物对应的是正义引物，下游引物对应的是反义引物。 (责任编辑：大汉昆仑王) ...

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重叠延伸PCR简介

重叠延伸PCR技术(gene splicing by overlap extension PCR简称SOE PCR)由于采用具有互补末端的引物使PCR产物形成了重叠链从而在随后的扩增反应中通过重叠链的延伸将不同来源的扩增片段重叠拼接起来.此技术利用PCR技术能够在体外进行有效的基因重组而且不需要内切酶消化和连接酶处理可利用这一技术很快获得其它依靠限制性内切酶消化的方法难以得到的产物.重叠延伸PCR ...

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引物设计的原理和程序（多图）

一、设计原理 1、择合适的靶序列:设计引物之前，必须分析待测靶序列的性质，选择高度保守，碱基分布均匀的区域进行引物设计。 2、长度：一般来说，寡核苷酸引物长度为15～30bp. 3、 Tm值：引物的Tm值一般控制在55～60℃，尽可能保证上下游引物的Tm值一致，一般不超过2℃。若引物中的G+C含量相对偏低，则可以使引物长度稍长，而保证一定的退火温度。 4、(G+C)含量:有效引物中(G+C ...

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