SinoBio Genotyping PCR Kit超敏基因组PCR扩增检测试剂盒（普通型）

普通型

Quick Load型（含上样染料）

E008-01A

100次(20μl)

120元

E008-2A

100次(20μl)

120元

E008-1B

A包装×5

540元

E008-2B

A包装×5

540元

产品描述：超敏基因组PCR扩增检测试剂盒（Genotyping PCR Kit）专门为基因组及微量DNA PCR扩增检测设计优化，可从少量基因组模板中高效扩增出0.2kb～4kb的目的条带，其灵敏度为普通PCR反应的100～10,000倍。适用于基因组PCR扩增、微量模板、复杂模板等的扩增和大规模基因检测。本产品包括2X反应缓冲体系和酶2个独立的组分，其2X Reaction Mix包含了genotyping PCR所需的全部试剂、dNTP及PCR增强剂。本产品使用方便快捷，使用时只需在2X Reaction Mix加入引物、模板及酶并加入去离子水稀释至1X即可进行反应。2X Reaction Mix提供不含染料/含染料（蓝色）两种形式供您选择，经测试，染料的加入不影响扩增性能。2X Reaction Mix中预混蓝色染料的，在配置反应体系时，可很方便地检测各组分混匀情况，在PCR反应完成后可直接电泳，节省时间。

产品用途：本品适用于从复杂背景中扩增微量模板DNA。由于Genotyping PCR的突变率高于普通PCR反应，故其产物不推荐用于需高保真的基因克隆。Genotyping PCR所用引物需精心设计，否则会扩增出较多杂带（参见PCR引物设计的黄金法则）。

使用说明：经测试按右侧反应体系及PCR程序可获得理想的扩增结果。推荐将此反应体系及PCR程序作为条件优化的初始反应。

扩增灵敏度检测对比

普通Taq酶扩增系统（上图） vs 超敏基因组PCR扩增检测系统（下图）：用浓度为100ng/μl的人基因组DNA将浓度1ng/μl含LacZ基因的质粒梯度稀释至一下浓度梯度：

1

2

3

4

5

6

0.1ng/μl

0.01ng/μl

1pg/μl

0.1pg/μl

0.01pg/μl

1fg/μl

从每个浓度梯度中各取1μl作为扩增模板，分别用普通Taq酶扩增系统（上图） 及超敏基因组PCR扩增检测系统（下图）对LacZ基因进行扩增（都分别进行40轮PCR扩增循环）。结果显示：超敏基因组PCR扩增检测系统检测灵敏度比普通Taq酶扩增系统高1,000倍以上。泳道M： DL2000 DNA Marker；泳道1～6：分别对应以上各模板浓度梯度

产品内容：

Taq DNA 聚合酶 （5U/μl）

30μl

2X GT PCR Reaction Mix

1m

质量保证：使用推荐体系及PCR程序（见下），可从100ng人基因组DNA背景中扩增检测出1fg LacZ质粒模板的存在。超敏基因组PCR扩增检测反应体系:

2X Reaction Mix

10μl

上游引物

0.05μM(终浓度)

下游引物

0.05μM(终浓度)

模板DNA

1～3μl DNA样品

Taq酶（5U/μl）

0.25

ddH2O

至20μl

*反应体系可成比例调整至50μl等体积

超敏基因组PCR扩增检测PCR程序

93℃

1分钟30秒

40次循环：

93℃，30秒57℃，30秒（57℃适用于大多数反应亦可在55～60℃间调整）65℃，按产物长度60秒/1kb计算