碧云天生产的BeyoFusion™ DNA Polymerase,是一种以嗜热古细菌DNA聚合酶(hyperthermophilic archaeon
Pyrococcus-like DNA polymerase)为基础通过突变等改造而获得的超高性能DNA聚合酶,它具有扩增速度快、保真度极高、扩增片段可以轻松达到12kb等优点。
BeyoFusion™ DNA Polymerase扩增速度极快,扩增小于6kb的DNA片段时,延伸1kb只需要15秒(参考表1)。普通的DNA聚合酶延伸1kb通常需要1-2分钟。BeyoFusion™ DNA polymerase由于其超快的扩增速度,可以显著缩短PCR扩增所需的时间。
BeyoFusion™ DNA Polymerase是一种高保真DNA聚合酶。BeyoFusion™ DNA Polymerase不仅可以非常高效地催化5'至3'方向的依赖于DNA模板的脱氧核苷酸的聚合反应,它同时还具有3'至5'的外切酶活性(proofreading activity),它的错误发生概率比Taq酶要低52倍,比pfu酶要约低6倍(参考表1)。
表1. BeyoFusion™ DNA polymerase的主要性能与Taq酶及同类产品的比较。
Product Name
Concentration
Manufactur
Velocity
Target Size
Fidelity
Product end
Taq
5U/μl
Various
1min/kb
2.3×10-5/nt/cycle
3'overhangs
Pfu
5U/μl
Various
2min/kb
2.6×10-6/nt/cycle
Blunt
Platinum Taq
5U/μl
Thermo
30s/kb
15kb
3.8×10-6/nt/cycle
3'overhangs
Phusion HF
2U/μl
Thermo
15-30s/kb
20kb
4.4×10-7/nt/cycle
Blunt
LongAmp Taq
2.5U/μl
NEB
50s/kb
30kb
1.2×10-5/nt/cycle
3'overhangs
Phusion HF
2U/μl
NEB
15-30s/kb
20kb
4.6×10-7/nt/cycle
Blunt
PfuUltra HF
2.5U/μl
Agilent
1-2min/kb
17kb
1.3×10-6/nt/cycle
Blunt
PfuUltra II FH
-
Agilent
15-30s/kb
19kb
1.2×10-6/nt/cycle
Blunt
KOD Dash
2.5U/μl
TOYOBO
30s/kb
18kb
5.8×10-6/nt/cycle
3'overhangs
KOD FX
1U/μl
TOYOBO
30s-1min/kb
40kb
2.1×10-6/nt/cycle
Blunt
BeyoFusion™
2.5U/μl
Beyotime
15-60sec/kb
>12kb
4.4×10-7/nt/cycle
Blunt
BeyoFusion™ Plus
2.5U/μl
Beyotime
15-60sec/kb
>12kb
2.2×10-6/nt/cycle
3' overhangs
BeyoFusion™ DNA Polymerase的扩增长度长,可以达到12kb。BeyoFusion™ DNA Polymerase非常适合长片段DNA的扩增,扩增出来的片段可以轻松达到12kb(参考图1和表1),更长片段的扩增效果未经测试。BeyoFusion™ DNA聚合酶可以轻松胜任具有复杂二级结构的、非常长的DNA片段的准确扩增,因此它是目的基因扩增和克隆的理想选择。 图1. BeyoFusion™ DNA polymerase以λDNA为模板,PCR扩增不同长度(0.5-12kb)片段的的电泳图。来源:BeyoFusion™ DNA polymerase通过大肠杆菌重组、表达、纯化而获得。
用途:高保真PCR (high fidelity PCR)、点突变、PCR克隆等。BeyoFusion™ DNA polymerase扩增出来的DNA片段为双平端(参考表1),可以直接用于双平端克隆,但不能直接用于常规的T载体克隆。如需用于T载体克隆,需在BeyoFusion™ DNA polymerase PCR扩增结束后加入常规量的普通Taq酶在72°C反应5-10分钟,使每条链的3'端加上一个A以形成粘端。
活性定义:One unit is defined as the amount of enzyme that will incorporate 10 nmol of dNTP into acid
insoluble material in 30 minutes at 74°C.
纯度:不含DNA内切酶、外切酶和磷酸酯酶,不含RNA酶,满足常规PCR反应要求。
酶储存溶液:20mM Tris-HCl (pH 7.5), 1mM DTT, 0.1mM EDTA, 100mM KCl, 200μg/ml BSA and 50% (v/v)
glycerol。
失活或抑制:酚氯仿抽提可以使BeyoFusion™ DNA polymerase失活。
包装清单:
产品编号
产品名称
包装
D7220-1
BeyoFusion™ DNA polymerase (2.5U/μl)
80μl
D7220-2
10X BeyoFusion™ Buffer (with Mg2+)
0.5ml
—
说明书
1份
保存条件:
-20℃保存。
注意事项:
PCR反应非常灵敏,在进行扩增反应时请注意避免微量待扩增DNA的污染,并尽量考虑设置不加模板的空白对照。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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