糖原PAS染色液(真菌专用)操作步骤

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糖原PAS染色液(真菌专用)操作步骤

2023-04-11 17:06| 来源: 网络整理| 查看: 265

中文名称:糖原PAS染色液(真菌专用) 产品规格:3×20mL|3×50mL 用途:大多数真菌染色(曲菌、白色念珠菌、组织胞浆菌、马尔尼菲青霉菌、新型隐球菌等) 注意事项:又叫真菌染色液(McManus PAS法),尤其适用于曲菌、白色念珠菌染色。真菌呈紫色,胞核呈蓝色。 储存条件:4℃,避光,12个月

产品简介:糖原染色是病理学中常规的染色方法之一,McManus在1946年最先使用PAS技术显示黏蛋白,该法常用来显示糖原和其他多糖,该技术不仅能显示糖原,还能显示中性黏液性物质和某些酸性物质以及软骨、垂体、霉菌、真菌、色素、淀粉样物质、基底膜等。糖类及有关物质中的1,2-乙二醇基被氧化为二醛,醛与Schiff试剂能结合成一种品红化合物,产生紫红色。氧化剂还可氧化细胞内其他物质,使用时应注意选择好氧化剂浓度和氧化时间,使氧化控制在既能把乙二醇基氧化成醛基又不至于过氧化,这是很关键的步骤。

糖原PAS染色液(真菌专用)利用真菌含有多糖,氧化剂氧化真菌壁上的多糖而暴露出醛基,醛基与无色Schiff结合呈现红色。该染色法性能稳定,特异性强;操作简捷,仅需0.5h;浓度低氧化剂更适用于对真菌染色,无盐酸乙醇分化液分化步骤。

操作步骤(仅供参考): 1、常规固定(常采用10%福尔马林),常规脱水包埋。 2、细胞涂片入蒸馏水(无需包埋、脱蜡)或组织切片脱蜡入蒸馏水。 3、入氧化剂室温氧化10min。 4、自来水冲洗2次,蒸馏水浸洗2次。 5、入SchiffReagent并加盖,置于室温阴暗处浸染10~20min。 6、亚硫酸钠溶液滴洗2次,每次2min。 7、流水冲洗2min。 8、逐级常规乙醇脱水。二甲苯透明,中性树胶封固。

染色结果: 真菌    紫红色 细胞质  深浅不一的红色 备注:颜色深浅很大程度上取决于样品在氧化剂和SchiffReagent中作用时间的长短。

阴性对照(可选): 1、取淀粉酶1g溶解于PBS(pH5.3)100ml,处理30~60min,与其他样本共同入氧化剂。结果应为阴性。 2、(备选方案)取唾液片(过滤后用)处理30~60min,与其他样本共同入氧化剂。结果应为阴性。 3、(备选方案)如果对照片采用其自身样本,对照片不经氧化剂这一步,直接入SchiffReagent。结果应为阴性。



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