3

您所在的位置:网站首页 native电泳缓冲液 3

3

#3| 来源: 网络整理| 查看: 265

非变性胶(Native-PAGE)

1、 将 GLASS Gel Native Tricine gel预制胶从包装袋中取出。

2、 将预制胶固定在电泳槽中。

3、 准备电泳缓冲液:5X 的阴阳极电泳液分别稀释成 1X 溶液,将预制胶装入兼容的电泳槽中,在内外槽分别加入阴极和阳极电泳液,再缓慢地将梳子拔出。

4、 上样前请使用移液器吸取阴极电泳缓冲液轻轻吹打加样孔,去除加样孔内残余的胶液。

5、 上样:将样品和 loading buffer(5X)按照 4:1混合均匀。注意枪头不要戳破凝胶,不要过度插入梳孔使胶板变形造成漏液。在梳孔内加入适当浓度和体积的蛋白样品。

6、 电泳条件:150 V, 60-70min,当溴酚蓝指示带电泳至胶板底部,或实验预定位置时,即可结束电泳。

7、 电泳结束,取出凝胶。用刀在侧边胶处,沿着两片玻璃的缝隙切开封胶材料,即可打开玻璃板,取凝胶时,需在凝胶和玻璃条之间,沿着玻璃条划一刀,防止取胶时,发生粘连使胶破碎。(使用美工刀时请注意安全)

 

变性胶(SDS-PAGE)

1、 将 GLASS Gel Tricine gel预制胶从包装袋中取出。

2、 将预制胶固定在电泳槽中。

3、 准备电泳缓冲液:5X 的阴阳极电泳液分别稀释成 1X 溶液, 将预制胶装入兼容的电泳槽中,在内外槽分别加入阴极和阳极电泳液,再缓慢地将梳子拔出。

4、 上样前请使用移液器吸取阴极电泳缓冲液轻轻吹打加样孔,去除加样孔内残余的胶液。

5、 上样:将样品和 loading buffer(2X)按照 1:1 混合均匀,100℃下加热 3-5min。注意枪头不要戳破凝胶,不要过度插入梳孔使胶板变形造成漏液。在梳孔内加入适当浓度和体积的蛋白样品。

6、 电泳条件:150 V, 40~50 min,当溴酚蓝指示带电泳至胶板底部,或实验预定位置时,即可结束电泳。

7、 电泳结束,取出凝胶。用刀在侧边胶处,沿着两片玻璃的缝隙切开封胶材料,即可打开玻璃板,取凝胶时,需在凝胶和玻璃条之间,沿着玻璃条划一刀,防止取胶时,发生粘连使胶破碎。(使用美工刀时请注意安全)

拆胶:

1、 先沿侧边胶处简单划一刀(或先将玻璃板侧边多余封胶材料去除);

2、 用刀在侧边胶处,沿着玻璃板和玻璃条的缝隙切开封胶材料(箭头处),轻轻打开玻璃板;

3、 取胶时,需在凝胶和两侧玻璃条之间沿着玻璃条划一刀,防止取胶时发生粘连使凝胶破碎。

 

 



【本文地址】


今日新闻


推荐新闻


CopyRight 2018-2019 办公设备维修网 版权所有 豫ICP备15022753号-3