摘要：本文介绍了液相色谱-质谱，质谱联用技术的新进展，综述了近年来该技术的应用及其发展前景。

1前言

近年来，由于液相色谱-质谱，质谱(lc-ms／ms)联用新技术的不断出现，lc-ms／ms已成为现代分析手段中必不可少的组成部分。lc／ms的联用始于70年代，90年代以来，由于大气压电离的成功应用以及质谱本身的发展，液相色谱与质谱的联用，特别是与串联质谱(ms/ms)的联用得到了极大的重视和发展。lc-ms／ms联用的优点非常显著，因为气相色谱只能分离易挥发且不分解的物质，而液相色谱则把分离范围大大拓宽了，生物大分子也能分离，lc与高选择性、高灵敏度的ms／ms结合，可对复杂样品进行实时分析，即使在lc难分离的情况下，只要通过ms1及ms2对目标化合物进行中性碎片扫描，则可发现并突出混和物中的目标化合物，显著提高信噪比。

液-质联用是通过一个“接口”来实现的。在接口研制方面，前后发展了有20多种，其中主要有直接导入界面、传送带界面、渗透薄膜界面、热喷雾界面和粒子束界面，但这些技术都有不同方面的限制和缺陷，直到大气压电离技术成熟后，液-质联用才得以迅速发展，成为科研和日常分析的有力工具。

2接口基本原理

有关各种电离技术文献已有评述，目前主要采用大气压电离(api)技术，api包括电喷雾电离(跚)和大气压化学电离(apci)。

2．1电喷雾电离(esi)

溶液中样品流出毛细管喷口后，在雾化气(n2)和强电场(3～6kv)作用下，溶液迅速雾化并产生高电荷液滴。随着液滴的挥发，电场增强，离子向液滴表面移动并从表面挥发，产生单电荷或多电荷离子。通常小分子得[m+h]+或[m-h]-单电荷离子，生物大分子产生多电荷离子，由于质谱仪测量的是质，荷比(m/z)，可测定的生物大分子的质量数高达几十万。

esi是很软的电离，可直接测定热不稳定的极性化合物，多电荷形成可分析蛋白质和dna等生物大分子，调节离子源(源内id))电压可以控制离子的断裂，给出结构信息。

2．2大气压化学电离(apci)

溶液中样品流出毛细管后仍由氮气流雾化到加热管中被挥发，在加热管端的corona尖端放电电极(最初利用同位素ni的电子放射)使溶剂分子形成反应气等离子体。样品分子与等离子体通过氢质子交换被电离，形成[m+h]+或[m-h]-，并进入质谱仪。

apci也是很软的电离，只产生单电荷峰，适合测定弱极性的小分子化合物。另外，它适应高流量的梯度洗脱，高低水溶液变换的流动相。通过调节离子源电压，可以得到不同断裂的质谱图。

2．3接口形式

接口是液-质联用的关键部分，在这里完成溶液的气化和样品分子的电离。由于大量生物样品的背景基底非常复杂，即使经过分离，还会很“脏”。因此在接口设计时，既要考虑离子化的效率，亦要考虑接口的抗污染和耐用。图给出了几种不同的api“接口”形式，采用z字形通道离子束引进系统，避免了中性或非挥发性物质直接进入采样孔，可有效地防止接口的玷污。

3应用

lc-ms／ms联用是继gc／ms联用之后又一新兴的分离检测技术，近来发展极为迅速。它在生命科学、环境科学、法医学、商检等领域得到了广泛应用。

3．1药物及体内药物分析

药物的是用来预防、诊断及治疗疾病的一类特殊物质，与人们的健康和生命安危有极其密切的关系，杂质检查及其限度控制是保证药品质量的一个重要方面。使用lc-ms／ms可以简便地对药物中杂质加以监控。nicolas对抗癌药物dup941生产中有关杂质建立了lc-ms／ms指纹图谱，不同生产的批次药物与已建立的谱图对照，从而达到质量控制目的。zhao鉴别和测定了氯沙坦片剂在储存过程中产生的微量降解产物。rourick建立了鉴定药品杂质及降解产物的lc-ms／ms方法，如头孢羟氨苄通过酸碱或加热处理使其降解，然后反相c18柱分离，利用ms／ms功能来鉴定杂质及降解产物的化学结构。

体内药物分析是测定体液(主要是血浆、血清或全血)中药物或其他代谢物浓度。由于血液样品试样提供量少，基质复杂，在此混合物中分析某种微量成分(通常为(g/ml或ng/ml水平)并加以鉴别，常常是对分析化学家的挑战。

lc-ms虽然有足够的灵敏度，但遇到lc难以分离的组分，其应用受到限制。使用lc-ms／ms可以克服背景干扰，通过ms／ms的选择反应控制模式(srm)或多反应检测模式(srm)，提高信噪比，因此对复杂样品仍可达到很高的灵敏度。lc-ms／ms对生物样品的提取、纯化和浓缩等前处理过程没有严格要求，一般采用液液萃取法(lle)或固相萃取法(spe)，但这两种方法的缺点是比较费时。在线萃取技术在省时和省力方面显出相当大的优越性。现有几种在线萃取技术，如在线固相萃取、柱切换、涂层毛细管微萃取(ccme，有时又称固相微萃取(spme)、多元lc系统等。在线萃取技术使得lc-ms／ms优点更加明显，它可以实现微量、高通量样品分析。

xia用两根平行的样品前处理柱oasis hlb(1×50mm，3μm)分别与一根分析柱相连接，利用柱切换技术在两根平行的样品处理柱之间交替进行净化、富集。此方法的样品量仅为10μl，净化时间0.3min，整个样品分析时间1.6min，而且方法精密度很好，日内、日间误差6.6％。hempenius将96孔固相萃取装置与lc-ms／ms相联，血浆样品直接注入孔内的spe柱中，净化后的样品再经lc分离，ms／ms采用选择反应检测模式(srm)，血浆样品中的氟哌啶醇检测限为0.1ng／ml，方法不准确度