本文培养基配置方案参考《分子生物学实验指南》以及根据课题组实际实践而整理的实验方案。

LB一般被解释为Luria-Bertani培养基，根据其发明人贝尔塔尼（Giuseppe Bertani）的说法，这个名字来源于英语的lysogeny broth，即溶菌肉汤。一般用该培养基来预培养菌种，使菌种成倍扩增，达到使用要求，可分为液体培养基和固体培养基。

国产的胰蛋白胨一般是以新鲜牛肉和牛骨经胰酶消化而得到，与进口的成分和工艺不同。进口的胰蛋白胨以酪蛋白为基础进行消化，实为胰酪蛋白胨；而国产的是以肉、骨为原料。含有丰富的氮源、氨基酸等，可配制各种微生物培养基，用于细菌的培养、分离、增殖、鉴定

采用以蛋白质含量丰富的食用酵母为原料，采用自溶、酶解、分离、浓缩等现代生物高新技术，将酵母细胞内的蛋白质、核酸等进行降解后精制而成的一种棕黄色可溶性膏状或浅黄色粉状纯天然制品。主要成分为多肽、氨基酸、呈味核苷酸、B族维生素及微量元素。

另外根据经验值用NaOH调节该培养基的pH，使其达到7.4，该pH适合目前使用最广的原核表达菌种大肠杆菌（E.coli）的生长。

1.根据需要，按上述配制体系按比例使用称量器进行称量（扣除琼脂糖！！），称取后转移到清洗干净的瓶子里（1L的大瓶子）。

2.加入目标量超纯水，上下混匀/磁力悬浮珠/玻璃棒搅匀（尽量减少泡沫产生），盖子拧紧。

3.静置5min左右，溶液呈深黄色均一液体，使用量筒按50ml or 100ml分装在洗好锥形瓶。

4. 高压（121℃，20min）灭菌后，结束后，取出放置4℃库存（实际放在柜子里就行）

1.根据需要，按上述配制体系按比例使用称量器进行称量，称取后转移到清洗干净的瓶子里。

2.加入目标量超纯水，上下混匀，盖子拧紧

3.进行灭菌锅（谨记高压锅使用指南）灭菌，记得高压前拧松瓶盖（防止爆裂）

4.高压（121℃，20min）灭菌后，冷却至手可以接触的温度（手温）

5.加入所需要的抗生素，摇匀

6.倒板，约1/3厚度（一般250ml倒20个板子）

7.等待凝固，使用封口膜封住，并写上标签（抗生素、时间、配制人），倒置放置4℃冰箱

硫酸卡那霉素（简称：卡那霉素）： Kanamycin即Kanamycin sulfate，中文名为硫酸卡那霉素，分子式：C18H36N4O11·H2SO4，分子量：582.58

卡那霉素为细菌培养常用抗生素，用于配制含卡那霉素的LB或LB平板等，也可以用于培养细胞的杀菌，对革兰氏阳性菌和阴性菌及支原体都有杀灭或抑制作用。

推荐工作浓度：10-100mg/L。

用于真核细胞培养时，推荐工作浓度为100mg/L。可以配制成10-50mg/ml的储备液。

储备液4℃稳定，-20℃可以长期保存。

氨苄西林（Ampicillin），又称氨苄青霉素，是一种β-内酰胺类抗生素，可治疗多种细菌感染。适应症包含呼吸道感染、泌尿道感染、脑膜炎、沙门氏菌感染症，以及心内膜炎。也能用于预防新生儿的B群链球菌感染，可经由口服、肌肉注射以及静脉注射给药。

使用方法:

氨苄青霉素微溶于水，易溶于酸或碱，而氨苄青霉素钠易溶于水。若使用氨苄青霉素配制，则应按照摩尔比1:1进行配制。配制OK后，需使用0.22um过滤除菌，分装后于-20℃保存，可保存数月。