羟自由基测定试剂盒原理和显色剂的配制方法！

产品名称：    羟自由基测试试剂盒英文名称：    Hydroxyl Free Radical assay kit产品规格：    50管/48样保存与运输：    按照说明书保存应用范围：    科研用检测试剂比色法的基本原理是朗伯(Lambert)定律，阐述为：光被透明介质吸收的比例与入射光的强度无关；在光程上每等厚层介质吸收相同比例值的光。

一、测定原理

Fenton反应是zui常见的产生羟自由基的化学反应，H2O2的量和Fenton反应产生的OH.量成正比，当给予电子受体后，用griess试剂显色，形成红色物质，其呈色与OH.的多少呈正比关系。

二、试剂组成与配制：

试剂一：3%H2O2标准品储备液0.5ml×1支，4℃保存3个月。0.03%标准品应用液的配制：3%H2O2标准储备液：蒸馏水=1：99稀释，现用现配。

试剂二：底物储备液1ml×1支，4℃保存3个月。

底物应用液的配制:

若您的样本为产生羟自由基，即测定管吸光度比对照管吸光度低，则底物应用液的配制：底物储备液：蒸馏水=1：99稀释，现用现配。若您的样本为产生羟自由基，即测定管吸光度比对照管吸光度高，则底物应用液的配制：底物储备液：蒸馏水=1：299稀释，现用现配。

试剂三：甲液储备液2ml×1支，4℃保存3个月，用时加蒸馏水1：9稀释成应用液。乙液7ml×2支，4℃保存3个月。

羟自由基测定试剂盒原理和显色剂的配制方法！

试剂三应用液的配制：甲液应用液与乙液等比例混合，用多少配多少，余下4℃保存。

试剂四：液体10ml×1瓶，用时加蒸馏水稀释至100ml，制备成应用液，4℃保存。若有结晶，则放置37℃水浴至全部溶解后再稀释。

试剂五：液体30ml×1瓶，避光4℃冰箱保存.

试剂六：液体30ml×1瓶，避光4℃冰箱保存.

试剂七：分析纯的冰乙酸（冰醋酸）自备。

显色剂的配制：试剂四应用液：试剂五：试剂六：冰乙酸=8：3：3：2，需多少配多少，现用现配。

注：抑制羟自由基的物质如：血清（浆）、各种组织匀浆液、口服液等；产生羟自由基的物质如：中性白细胞、某些药物、部分植物等。 

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