甘油三酯测定试剂盒(单试剂GPO |
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甘油三酯测定试剂盒(单试剂GPO
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本试剂盒采用GPO-PAP酶法配制，用于体外测定甘油三酯含量，适用于各型酶标仪。 测定原理： 性能指标： 试剂空白管吸光度：≤0.200（光径0.5cm）线性：0～9.04mmol/L范围内，r2＞0.995准确度：相对偏差≤10%灵敏度：测试2.26mmol/L被测物时，吸光度值△A在0.1800～0.2500之间。重复性：测量精密度≤5.0%，批间差≤8.0%。稳定性：未开封在2～8℃避光保存，有效期为1年。开启后2～8℃避光可稳定一个月。产品组成： 组分规格成分浓度工作液（酶剂） 25mLTris-HCL缓冲液100mmol/L脂肪酶≥3000U/LATP0.5mmol/L甘油激酶≥1000U/L3-磷酸甘油氧化酶≥5000U/L过氧化物酶≥1000U/L4-氨基安替比林1.4mmol/L对氯酚3mmol/L校准品0.1mL甘油见标签96孔平底酶标板(赠品)一块--保存：2～8℃，避光，有效期1年。注意事项： 本制品仅用于科研，不得用于临床诊断，切勿服用。样品含量如超出检测范围上限时，可用生理盐水稀释样本后进行测定，测定结果乘以稀释倍数。试剂防止葡萄糖、胆固醇等试剂的污染。试剂与样本量可按照全自动生化分析仪的要求，按照1∶100的比例增减。测定样本时若测定OD值大于0.5，请将样本稀释后测定。操作过程： 样本处理： 血清(浆)：直接测定，如超过线性范围用生理盐水稀释后测定。培养液样本：吸取培养液，1000转/分，离心10分钟，取上清测定。一般建议细胞密度在100万个/mL以上。组织样本：准确称取组织重量，按重量(g)∶体积(mL)=1∶9的比例，加入9倍体积的匀浆介质，冰水浴条件下机械匀浆，2500转/分，离心10分钟，取上清液待测。如组织样本为非高脂样本，匀浆介质用磷酸盐缓冲液(0.1mol/L pH7.4)或生理盐水（0.9%）进行提取；如组织样本为高脂样本或部分为高脂样本，匀浆介质可统一用无水乙醇进行提取。细胞样本：细胞收集：将制备好的细胞悬液取出，1000转/分，离心10分钟，弃上清液，留细胞沉淀；用等渗缓冲液（推荐0.1mol/L、pH7.0～7.4磷酸盐缓冲液）清洗1～2次，同样1000转/分，离心10分钟，弃上清液，留细胞沉淀。细胞破碎：加入0.2～0.3mL的匀浆介质（推荐0.1mol/L pH7～7.4磷酸盐缓冲液或生理盐水）进行匀浆，冰水浴条件下超声破碎(功率:300W,3～5秒/次，间隔30秒，重复3～5次)或手动匀浆，制备好的匀浆液不离心直接测定。也可采用裂解液裂解(推荐TritonX-100，1～2%，裂解30～40分钟)，裂解好的液体不离心直接测定。建议细胞密度在100万个/mL以上。破碎好的液体可显微镜观察细胞是否破碎完全。操作表：成分空白孔标准孔样本孔蒸馏水2.5μL校准品2.5μL样本2.5μL工作液250μL250μL250μL震荡孔板混匀，37℃孵育10分钟，波长510nm，酶标仪测定各孔吸光度值。计算方法： 血清等液体样本计算公式：甘油三酯含量(mmol/L)＝A样本孔－A空白孔×C标准A标准孔－A空白孔C标准：标准品浓度，mmol/L。举例说明：例1、取正常人血浆2.5μL，按操作表操作，得空白孔吸光度0.0573，校准孔吸光度0.2340，样本孔吸光度0.1283，则计算如下：甘油三酯含量(mmol/L)＝0.1283 - 0.0573×2.26＝0.9081mmol/L0.2340 - 0.0573例2、取大鼠血浆2.5μL，按操作表操作，得空白孔吸光度0.0573，校准孔吸光度0.2340，样本孔吸光度0.1030，则计算如下：甘油三酯含量(mmol/L)＝0.1030 - 0.0573×2.26＝0.5848mmol/L0.2340 - 0.0573组织、细胞样本计算公式：用PBS或生理盐水作匀浆介质提取样本计算方法（此方法需要另外测定匀浆液蛋白浓度）：甘油三酯含量(mmol/gprot)＝A样本孔－A空白孔×C标准÷CprA标准孔－A空白孔Cpr：待测组织样本匀浆蛋白浓度，gprot/L。（prot指蛋白）测定蛋白浓度的试剂盒可选购总蛋白定量测定试剂盒(带标准：BCA法)(微板法)(货号：SNM079)。用无水乙醇作匀浆介质提取样本计算方法（此方法不需要另外测定匀浆液蛋白浓度）：甘油三酯含量(mmol/g鲜重)＝A样本孔－A空白孔×C标准÷WA标准孔－A空白孔V提取液W：组织重量（g）；V提取液：加入的提取液(乙醇)的总体积，L。注：细胞样本测定时可将上式中的W/V提取液替换为细胞前处理时的细胞密度。举例说明：例：取10%小鼠肝匀浆2.5μL，按操作表操作，得空白孔吸光度0.0580，校准孔吸光度0.2352，样本孔吸光度0.1583，同时测得10%小鼠肝匀浆蛋白浓度为12.0121gprot/L，则计算如下：甘油三酯含量(mmol/gprot)＝0.1583 - 0.0580×2.26÷12.0121＝0.1065mmol/gprot0.2352 - 0.0580相关搜索：甘油三酯测定试剂盒(单试剂GPO-PAP法,酶标仪及生化分析仪)，甘油三酯，TG，Triglyceride assay kit |
生成的醌类化合物颜色的深浅与甘油三酯的含量成正比，分别测定标准管和样本管的吸光度值，可计算样本中甘油三酯的含量。【本文地址】
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