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布鲁克创新的真空绝缘加热电喷雾离子源(VIP-HESI)与离子淌度质谱(TIMS)相结合(图1),为4D-代谢组学/脂质组学研究提供最佳解决方案。VIP-HESI是一个集成APCI探头的双离子源,与timsTOF系统和impact II兼容,无需换源即可实现不同离子化方式的切换。值得注意的是,在正离子模式和负离子模式下,HESI和APCI模式都能显著提高灵敏度。借助离子淌度的分离能力,在降低本底噪音的同时获得更清晰的二级谱图,有助于脂质鉴定。 ![]() 01 VIP-HESI双离子源与TIMS结合助力4D-代谢组学/脂质组学 本研究利用脂质标准品在有无基质存在情况下,分别使用VIP-HESI和布鲁克传统Apolo II ESI离子源进行数据采集,以评估新型VIP-HESI离子源的检测限 (LOD)、动态范围。实验方案 LC:布鲁克Elute UHPLC, 色谱柱:YMC-Triart C18(100 x 2.1 mm, 1.9 um)。液相梯度运行时间为5min,进样量为5μL;MS:timsTOF Pro;采集模式:PASEF,负离子模式;软件:MetaboScape® 2021b,通过基于规则的脂质注释进行分析;利用TASQ 2021b 进行定量分析;试剂:血清SRM1950(Sigma)、氘代SPLASH混合脂质标准品(Avanti Lipids)。 实验结果 VIP-HESI源提高检测限(LOD)为了评估LOD,将一系列SPLASH混合物溶解于1mL甲醇或30µL SRM1950基质中(30µL SRM1950血浆提取物相当于1mL甲醇)实验结果如图2所示,与传统ESI源相比,VIP-HESI源显著提高LOD。![]() 02 比较VIP-HESI与标准Apolo II离子源的LOD 注:将检测限定义为信噪比S/N>3, ESI/HESI LOD比例10分别采用不同背景颜色表示;*表示血浆中基质降低LOD 如图3所示,较传统ESI源相比, VIP-HESI具有更好的电离能力,在负离子模式下,血浆中脂质的检测灵敏度获得了5倍提升。 ![]() 03 血浆中脂质在VIP-HESI源下强度提升5倍 VIP-HESI源显具有更高的动态范围以Lyso PE 18:1(d7)为例,在保持校准函数的线性的前提下,VIP-HESI将定量限(LOQ)降低了一个数量级(图4),结果表明较ESI相比,VIP-HESI源能够提供更高的的动态范围。![]() 04 Lyso PE 18:1(d7)在使用VIP-HESI(红)和ESI离子源(蓝)的线性范围 小结 新型VIP-HESI双离子源与离子淌度技术相结合,为脂质组学提供了更深入和更广泛的分析手段,能够识别出更多的独特脂质,从而得到更加全面的生物学信息。 ▼▼点击“阅读原文”,收获更多资料 |
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