纳升移液的自动化系统

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纳升移液的自动化系统

2024-07-15 07:34| 来源: 网络整理| 查看: 265

近年来由于二代测序技术的不断发展,基因组测序成本呈数量级式下降,然而样品的文库制备仍是降低测序成本的限速环节。测定基因组序列时,由于受手动处理最小工作体积限制,及文库只有一小部分用于测序,会导致建库试剂、检测试剂的浪费。利用Echo超声微量移液器可进行建库和检测的微量化反应,从而限制文库过度生成,节省昂贵的试剂成本。 Echo系统不同于传统移液工作站,它结合创新的动态液体分析技术和声波移液技术,可采用声波能量准确的转移液体。支持完成从取样、配制建库反应体系、PCR体系、文库均一化到pooling的过程,可广泛应用于全基因组多重测序和微生物组研究等多组学分析和实验。

Echo自动化移液 建库测序过程

Echo移液工作站采用动态液体分析技术,通过声能判断液体组成成分、母板中液体高度,进而计算向目标板中转移精确体积的液体所需的能量。声能转换器位于母板孔下方,向待转移液体的液面发射聚焦声能,精准的将体积为2.5nL或25nL的液滴流(取决于使用设备型号)转移至倒置的目标微孔中。移液过程中,声能转换器和目标板同时移动,使其能够以快于传统移液技术的速度将母板任意孔内液体转移到目标任意孔中。同时,动态液体分析技术实施调节移液参数,在无需重新校准的情况下补偿液体高度和液体性质发生变化带来的影响。

该移液工作站支持从Echo Qualified 384孔微孔板和6孔样品试剂槽中移液。通过向母板孔中转移不同体积的样品、试剂、引物、文库等,可快速完成样品、建库试剂、PCR Mix体系、检测试剂配制;实现样品的pooling和浓度均一化;支持用户自定义转移区域。

操作温和,安全移取样品和试剂; 无需吸头,非接触式转移,无样本渗漏、残留及交叉污染风险; 移液量程小且准确,减小反应体系,降低试剂成本,节约宝贵样品; 任意孔间高通量移液,可重复移取复杂的试剂组合或性质不一致的试剂,快速进行高度复杂的多组分分析和实验。 二代测序微量化文库构建结果 1、文库定量

Fig1 Piogreen进行文库量检测,随PCR体系减少,文库产量下降。

2、文库大小检测

Fig2 0.6x SPRI磁珠纯化后出库。随片段化体系减少,文库平均长度依次为 419 bp 、410 bp、372 bp、378 bp、335 bp。峰面积大小下降表明较小体积扩增时 文库产量较少。

3、测序质量

Fig3 不同建库条件及产出文库的覆盖率和质量。

Fig4 从上到下依次为Tag25/PCR25、Tag25/PCR2.5、Tag12.5/PCR6.25、Tag6.25/ PCR6.25和Tag1.25/PCR2.5,覆盖率均高度一致。

建库反应体系和检测体系减少20倍时,与手动方案反应量相比,测序数据的覆盖率、标准偏差等没有显著影响。Echo移液器的微量化工作流程可以大大减少试剂成本和原材料用量,提高通量、缩短生产周期,进行微生物的高质量全基因组测序。

※ 以上产品仅用于工业及科研,不用于临床诊断。



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