DiO(细胞膜绿色荧光探针)产品描述

DiO是一种亲脂性的荧光染料，可以用来染细胞膜和其它脂溶性生物结构进入细胞膜后，DiO在整个细胞膜上扩散，最佳浓度时可以使整个细胞膜染色。DiO在进入细胞膜之前荧光非常弱，当与细胞膜结合后其荧光强度大大增强，DiO被激发后可以发出绿色的荧光，具有很高的淬灭常数和激发态寿命。可以用标准的 FITC滤光片检测。DiO通常不会明显影响细胞的生存力(viability)，因此被广泛用于正向或逆向的，活的或固定的神经等细胞或组织的示踪剂或长期示踪剂(long-term tracer)。除了最简单的细胞膜荧光标记外，还可以用于检测细胞的融合和粘附，检测发育或移植过程中细胞迁移，通过FRAP(Fluorescence Recovery After Photobleaching)检测脂在细胞膜上的扩散，检测细胞毒性和标记脂蛋白等。

操作步骤：使用方法

1. 染色液制备

（1）配置DMSO或EtOH 储存液：储存液用 DMSO或EtOH配置浓度1～5 mM。

注意：未使用的储存液保存在-20℃，分装保存，避免反复冻融。

（2）工作液制备：用合适的缓冲液（如：无血清培养基，HBSS或PBS）稀释储存液，配制浓度为1～5 μM的工作液。

注意：工作液最终浓度是根据不同细胞和实验的经验来配制。可从推荐浓度的十倍以上找最佳条件。

2. 悬浮细胞染色

（1）悬浮细胞密度为 1 × 106/mL加入到工作液中。

（2）在37 ℃培养细胞 2～20分钟，不同的细胞最佳培养时间不同。

（3）染色细胞试管在1000～1500转离心5分钟。

（4）倾倒上清液，再次缓慢加入预温37℃的培养液。

（5）重复（3），（4）步骤两次以上。

3. 粘壁细胞的染色

（1）使粘壁的细胞在无菌实验室培养。

（2）从培养基中移走盖玻片，吸走过量培养液，将盖玻片放在潮湿的环境中。

（3）在盖玻片的一角加入100μL的染料工作液，轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。

（4）在37 ℃培养细胞 2～20分钟，不同的细胞最佳培养时间不同。

（5）吸干染料工作液，用培养液洗盖玻片2～3次，每次用预温的培养基覆盖所有细胞，培养5～10分钟，然后吸干培养基。

4. 显微镜检测

（1）DiD，DiO，DiI，DiR和DiS滤光器的选择参见表1。

（2）多色染料的同时检测，滤光器按照以下设定：

a) DiI和DiO＝Omega XF52，Chroma 51004；

b) DiI和DiD＝Omega XF92，Chroma 51007；

c) DiI，DiO和DiD＝Omega XF93，Chroma 61005

5. 流式细胞仪检测

染色的细胞可以分别用经典的FL1，FL2，FL3和FL4流式细胞仪检测。

注意事项

1)荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。

2) 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

保存条件：

4℃避光保存，一年有效。配制的储存液-20℃避光保存，半年有效。

注意事项：

荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 

4',6-联脒-2-苯基吲哚二盐酸盐 28718-90-3

DAPI染色液 28718-90-3

碘化丙啶 25535-16-4

PI染色液 25535-16-4

Hoechst 33258 23491-45-4

Hoechst 33258染色液 23491-45-4

Hoechst 33342 23491-52-3

Hoechst 33342染色液 23491-52-3

钙黄绿素乙酰甲酯 148504-34-1

二乙酸荧光素；荧光素二乙酸酯 596-09-8

5(6)-羧基荧光素二乙酸酯 124387-19-5 

5(6)-羧基二乙酸荧光素琥珀酰亚胺酯 150347-59-4

5(6)-羧基-2',7'-二氯荧光素二乙酸酯 127770-45-0

5(6)-羧基-2',7'-二氯二乙酸荧光素琥珀酰亚胺酯 150347-59-4 

罗丹明B己酸酯高氯酸盐 /

尼罗红 7385-67-3

DiD 高氯酸盐 127274-91-3 

DiD三氟甲磺酸盐 /

DiD三氟甲磺酸盐（5mM DMSO溶液） /

DiIC12(3)高氯酸盐 75664-01-6

DiIC12(3)三氟甲磺酸盐 /

DiIC16(3) 高氯酸盐 "78566-75-3

84109-11-5"

DiIC18(3)-DS /

DiIC18(5)-DS /

DiIC1(5)碘化物 36536-22-8 

9-DiI 甲磺酸盐 /

DiI碘化物 /

DiI高氯酸盐 41085-99-8

DiI三氟甲磺酸盐 /

DiOC2(3)碘化物 "905-96-4

57441-62-0 "

DiOC3(3)碘化物 53213-79-9

DiOC7(3)碘化物 53213-83-5

DiOC16(3)高氯酸盐 /

DiOC5(3)碘化物 53213-81-3

DiOC6(3)碘化物 /

1,1‘-双十八醇酯基-5,5’-二苯基-3,3,3',3'-四甲基吲哚碳箐盐酸盐 /

DiO高氯酸盐 34215-57-1

DiR碘化物 /

DiSC2(3) /

DiSC3(5) 53213-94-8

PKH26红色荧光细胞链接试剂盒 /

Super ECL Plus超敏发光液 /

竹红菌乙素 123940-54-5  

竹红菌甲素 77029-83-5