​​流式细胞术的荧光补偿。

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本文介绍了流式细胞术需要补偿的原因，以及如何应用补偿。请参见制造商说明和软件手册，获取有关您仪器的详细补偿步骤。

所有的荧光染料都同时具有激发和发射光谱。激发光谱是增加荧光染料能量的光波长范围，可使荧光染料发射另一波长范围的光，即发射光谱。

在流式细胞仪中，带通滤光片用于选择适宜范围的激发和发射波长。但是，当发射光谱重叠时，会检测到来自一种以上荧光染料发射的荧光。因此，为修正这类光谱重叠，需要进行荧光补偿。这一过程可确保特定检测器检测的荧光仅来自目标荧光染料。 

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下面的示例中，受 488 nm 的光激发后，PE 发射的光大部分被专门检测 PE 的检测器检测到，但是发射光谱尾部落在了用于检测 PE-Cy5 的带通滤光片中。这样，PE-Cy5 通道中就会观察到“假阳性”信号，因此需要进行荧光补偿以修正这类重叠。