植物叶绿素测定 |
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植物叶绿素测定方法:乙醇提取比色法[1] 将实验材料去除大主脉,在0.0001的天平上称取0.5g左右的叶片至于50ml离心管中,依次加入20ml 95%的乙醇密封,在黑暗条件下室温提取24-36h,直至组织变白,随后用紫外可见分光光度计,在波长665、649和470 nm下分别进行比色。根据各波长的OD值(optical density(光密度)即为吸光度)计算叶绿素a、b和类胡萝卜素的浓度(mg/L),根据求得的浓度再计算出各色素含量(mg/g鲜重表示)。[1] 叶绿素a含量 Ca=(13.95*A665-6.88*A649) 叶绿素b含量 Cb=(24.96*A649-7.32*A665) 类胡萝卜素含量 Cxc=(1000*A470-2.05*Ca-114.8*Cb)/245 求得色素的浓度后,再计算组织中色素的浓度: 叶绿体色素的含量(mg/g)=C*V/(W*1000) 其中:C:色素含量(mg/L) V:提取液的体积(ml)。即为20 W:样品鲜重(g)。即为0.5 叶绿素总量=叶绿素a含量+叶绿素b含量 [1] 胡秉芬,黄华梨等. 分光光度法测定叶绿素含量的提取液的适宜浓度[J]. 草业科学, 2018, 035(008):1965-1974. |
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