CTLA4人源化小鼠构建策略。在 C57BL/6J 遗传背景下，将人源 CTLA4 蛋白编码序列插入小鼠 Ctla4 基因的 ATG 位置，在表达全人源 CTLA4 蛋白的同时取代小鼠內源 Ctla4 的表达。

FACS 检测CTLA4 人源化小鼠活化后脾脏淋巴细胞的CTLA4 表达。CTLA4 人源化纯合子小鼠脾脏淋巴细胞经anti-CD3 和anti-CD28刺激 72h 后收集细胞染色，FACS 检测人源CTLA4 表达。结果显示：CTLA4 人源化纯合子小鼠活化的CD4+ 和CD8+ T 淋巴细胞中可以检测到人源CTLA4 的活跃表达。（与CrownBio 合作完成）

· CTLA4人源化小鼠MC38荷瘤模型体内验证结果

图4.  CTLA4人源化小鼠模型的抗CTLA4人源化抗体Ipilimumab 体内抗肿瘤效果。 (数据为与信达生物制药有限公司合作完成)

分组和给药以及检测：将MC38结直肠癌细胞接种于CTLA-4转基因小鼠右侧背部皮下，成瘤后随机分为2组，然后分别给予Ipilimumab 10 mg/kg或者等体积生理盐水进行治疗，每周给药2次，连续给药4次，每次给药前测定肿瘤体积。

实验结果：抗human-CTLA4药物Ipilimumab能够显著抑制MC38肿瘤在CTLA-4小鼠体内的生长，给药1周后即可检测到肿瘤抑制效果，给药2周后可见非常显著的抑制效果（如上图），同时Ipilimumab治疗组有2只动物肿瘤完全消失，而对照组则肿瘤持续生长。

图5. CTLA4人源化小鼠模型的抗CTLA4人源化抗体Ipilimumab 体内抗肿瘤效果。 (数据为与PharmaLegacy合作完成)

CTLA4 人源化小鼠 MC38 荷瘤模型体内抗肿瘤药效验证。CTLA4 人源化纯合子小鼠接种 MC38 结肠癌细胞系，肿瘤生长至约 100 mm3随机将动物分组为对照组和治疗组（n=9）。结果显示： 针对人的 CTLA4 阳性药物 Yervoy 有非常显著的抗肿瘤效果（p