为什么cDNA文库没有启动子和终止子

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为什么cDNA文库没有启动子和终止子

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启动子,终止子都不在编码区。启动子和终止子都是控制RNA转录的DNA序列,但是他们本身并不被转录到RNA当中。只有在RNA上的序列(不论是否是编码区)才会出现在cDNA文库中。以mRNA为模板,经反转录酶催化,在体外反转录成cDNA,与适当的载体(常用噬菌体或质粒载体)连接后转化受体菌,则每个细菌含有一段cDNA,并能繁殖扩增,这样包含着细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合。

扩展资料:反转录不成功,说明一次文库方案的夭折。反转录效率不高表现在一是部分mRNA被反转录了,但还有相当一部分本该反转录的mRNA未被反转总的全长cDNA太少,这就难以构建好的全长cDNA文库。mRNA的cDNA,与原来的基因组DNA相同而且无内含子;相反地,对应于在原来基因中没有的而在mRNA存在的3'末端的poly A序列等的核苷序列上,与外显子序列、先导序列以及后续序列等一起反映出mRNA结构。遗传控制中最大的困难并不是DNA的克隆,而是需要被克隆的特异DNA片段的分离 。如果以克隆基因为目的,特异DNA片段的分离将大大有助于获得与遗传信息同样多的相关的基因产物,一般说这些基因产物均为蛋白质多肽,因此抗该蛋白质的抗体对于测定和沉淀蛋白质及其前体有重要用途,甚至可用于了解蛋白质分子量。参考资料来源:百度百科--cDNA文库参考资料来源:百度百科--cDNA



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