一、培养基用途：

  用于艰难梭菌的选择性分离培养。

二、培养基成分及使用方法：

  1.培养基成分

成分

含量（g/L）

胰蛋白胨

10.0

牛肉浸粉

10.0

酵母粉

3.0

葡萄糖

1.0

可溶性淀粉

1.0

氯化钠

5.0

碳酸氢钠

0.4

L-半胱氨酸盐酸盐

0.5

丙酮酸钠

1.0

L-精氨酸

1.0

焦磷酸盐

0.25

果糖

6.0

琥珀酸

0.5

氯化血红素

0.01

中性红

0.03

琼脂

13.2

pH 7.2±0.2 25℃

  2.使用方法

  称取本品 53.20g，加热溶解于1000ml蒸馏水中，分装三角瓶，每瓶200mL。121℃高压灭菌15min，冷却至45-50℃时，每200mL培养基加入50%卵黄乳液10mL、无菌环丝氨酸0.1g和无菌头孢西丁3.2mg。混匀，倾入无菌平皿，备用。

三、 原理：

  蛋白胨、牛肉浸粉、酵母粉、葡萄糖可溶性淀粉、L-半胱氨酸盐酸盐、L-精氨酸、焦磷酸盐、氯化血红素、琥珀酸、丙酮酸钠提供碳源、氮源、维生素和生长因子；果糖为可发酵糖类；氯化钠维持均衡的渗透压；中性红是酸碱指示剂，酸性条件变黄；琼脂是培养基凝固剂；环丝氨酸和头孢西丁可抑制杂菌和其他梭菌；50%卵黄乳液可检验是否产脂酶，艰难梭菌不产生脂酶故无沉淀环。

四、实验结果：

  1.按使用方法制备培养基，接种以下质控菌株，放置35℃厌氧培养48小时。

质控菌株

菌株编号

接种量（CFU）

生长情况

其他特征

艰难梭菌

ATCC43593

/

生长良好

黄色菌落，无沉淀环

产气荚膜梭菌

ATCC13124

/

抑制

/

  2.艰难梭菌在培养基上的生长情况如下图所示：

   图1-1  CCFA琼脂培养基微生物质控结果

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