一文了解APTT以及它的纠正实验

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一文了解APTT以及它的纠正实验

2023-07-16 15:16| 来源: 网络整理| 查看: 265

4.APTT现在的用途是什么呢?

随着实验技术的发展,APTT的作用已经不仅仅是最开始用来筛查血友病的检测了。为了更好的说明APTT现在的用途,不得不放出下面这张图了----瀑布学说中的APTT部分,一张清晰明了但劝退了无数人进入出凝血领域的图。

图1,瀑布学说APTT部分,PL为磷脂

当我们就“什么是APTT”查阅书籍文献时都会看到一个“官方定义“:反应内源及共同途径的凝血筛选试验。结合这个定义我们简化一下这张图:从XII因子至VIII因子这一部分为内源途径,这一途径包括了凝血因子和磷脂。从X因子到最后的纤维蛋白多聚体为共同途径,这一途径同样包括了因子与磷脂。为什么在这里会粗暴的将这么多内容仅分为 因子与 磷脂这两类呢?让我们再看一下下面这张表格:

图2,所有凝血因子名称,特征,作用

实际上除了XII,XI,VIII等这些罗马数字代表的是因子外,纤维蛋白原(Fibrinogen)、凝血酶原(prothrombin)以及 Ca 2+ 也都是凝血因子。这是一个非常容易被忽略掉的概念。现在让我们再重新看第一张图,图中除了 因子之外剩下的就是 磷脂了,这样我们就能够知道APTT实验结果延长能告诉我们什么了:

(1)凝血因子缺乏:这其中第一种可能就是因子生成缺乏,比如血友病,肝病(因为绝大部分凝血因子都在肝脏中合成)等。第二种可能就是药物原因造成的因子消耗增多,比如肝素能够催化抗凝血酶来灭活凝血酶,造成凝血酶的消耗增多,那么凝血酶作为共同途径的重要一环就会造成APTT结果的延长。还有一种就是疾病导致的因子消耗增多,比如DIC等,DIC是由于血液内凝血机制被弥散性激活,凝血因子大量消耗引起全身性出血倾向,此时APTT的结果自然也会延长。

(2)因子抑制物的存在:在凝血因子含量正常的情况下,如果体内存在因子抗体也同样会造成APTT的延长。比如VIII因子抗体会干扰VIII因子发挥正常的生理作用,导致图一的过程不能顺利进行,因此就会延长APTT的实验结果;同样,低分子肝素导致APTT实验结果延长的原因是在于低分子肝素能够通过抑制Xa因子活性来达到抗凝的目的。从某种程度上来说,低分子肝素也是X因子的一种抑制物。

(3)抗磷脂抗体的存在:内源途径和共同途径中都需要磷脂来帮助因子的活化,因此当血液中存在磷脂抗体拮抗了磷脂同样会造成APTT的延长。

如果想了解所有导致APTT实验结果延长的原因及APTT实验的主要用途,请参见图3和图4。

图3

图4

小结一下,除去最初的筛查血友病外,APTT实验现在还主要用来筛查止血的异常,监测肝素以及筛查狼疮抗凝物。

那么既然有以上几种可能造成APTT延长,我们又要如何区分呢?这时候APTT纠正实验这个小可爱就出现了。

5.APTT纠正实验(mixing study)

完整的纠正实验包括两部分:立即测定和温育试验。

第一部分--立即测定:

A:患者血浆与正常混合血浆1:1混合后立即测定APTT;

B:正常混合血浆APTT实验;

C:患者血浆APTT实验。

这里的A,B,C分别对应了报告单中的第7、3、5项。在A中出现了一个1:1的混合血浆,如字面所言这一步是将患者的血浆与正常混合血浆NPP(normal pooled plasma,也有写作PNP,pooled normal plasma的)。在得到这三个APTT的结果后需要进行一步Rosner指数的计算。

Rosner指数(RI)=(A-B)×100/C

RI>15.0:未纠正,提示存在可立即起作用的凝血抑制物(如肝素、狼疮抗凝物、部分凝血因子抗体)。

12≤RI≤15:边缘值,需要结合临床观察。

RI10秒:提示存在时间依赖性凝血因子抑制物(如VIII因子抑制物)

D与D-A对应了报告单中的第8和第2项。

6.纠正实验的结果判读

7.关于APTT纠正实验的几点讨论

(1)NPP的来源主要是商业试剂与实验室自行配置两种,本实验室采用的是自行配置的NPP。需要注意的是,由于因子稳定时间较短,因此配置好的NPP保存时间不宜过长,本实验室的经验NPP在-80℃的条件下保存时间不宜超过两周。

(2)1:1混合比例的选择基于因子活性在50%时APTT的结果即可为正常的理论基础之上产生的。

(3)本实验室是在总了和国内若干实验室所采用的标准后决定采用ROSNER指数来判断APTT是否纠正。大多数选择ROSNER指数为判断标准的实验室认为它是以一个相对关系来判断,能够排除试剂种类、固定阈值选择等问题对结果造成的干扰。

(4) 除Rosner指数外,也有实验室将 1:1混合血浆APTT结果恢复到正常参考区间范围内视为纠正, APTT秒值降低但未到正常参考区间范围内属于部分纠正。

(5)为什么要做温育实验?因子抗体的特点主要在于时间温度的依赖性,在立即实验时由于因子抗体的活性还没有产生,实验结果可能为阴性,但当温育1-2小时后其活性产生会导致1:1混合血浆APTT的延长。

(6)关于温育时间1小时还是2小时?同样也并没有完全统一的标准,不过在最近的一篇文献中有病例指出2小时的孵育时间可能造成APTT的假性延长。本实验室也将进一步考虑是否要将孵育时间更改为1小时[7]。本实验室现在正在进行的一个温育时间比较的课题研究,希望能够找到这几种方法的区别与准确性。

(7)到目前为止对于纠正实验没有统一标准,开展这项实验的实验室也都在进行着各种探索。血浆混合的比例、孵育的时间、纠正的判断标准等都有着不同的标准。但共识是无论是APTT实验还是APTT纠正实验,其本质都是一个 筛查实验,无法给出诊断性的结论。个人认为,结合患者病史,治疗方案去综合分析可以更好地理解这两个实验的实验结果。不必过于深究到底要以什么标准去做。纠正实验能提供的是一个诊断思路,帮助我们找到进一步检查的方向。但是关键的还是需要去做下一步的确诊性实验如狼疮抗凝物,因子活性和因子抑制物检测等等实验。

(8)作为实验室工作人员,我们在分析所有检测结果之前还要考虑到分析前与分析中的因素,例如抗凝比例是否正确?是否有根据红细胞压积调整过采血量?采血过程有没有肝素污染?所用试剂的敏感性等等这些问题都需要优先考虑之后再去进行APTT延长的原因分析。

总体来说,APTT纠正实验始终是筛查试验,更关键的还是后续的诊断性实验。本文旨在交流与探讨关于APTT与纠正实验的相关内容,如有任何不妥当之处欢迎指正,也希望学习您实验室的报告和解读。返回搜狐,查看更多



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