碧云天生产的7-AAD细胞活力检测试剂盒(7-AAD Cell Viability Assay Kit)是一种基于远红外荧光探针7-AAD (7-aminoactinomycin D)特异性染色细胞膜丧失完整性的坏死细胞的特性开发的能够特异地对坏死细胞的细胞核进行染色从而检测细胞坏死的试剂盒。本试剂盒可与Annexin V-FITC/EGFP/PE、Calcein AM等联用而用于细胞凋亡与坏死或死活的检测，适用于流式细胞仪、荧光显微镜或其它荧光检测设备。

7-AAD，英文全称为7-aminoactinomycin D，中文名称叫做7-氨基放线菌素D，是一种能够嵌入核酸的荧光指示剂，形成的DNA复合物在546nm激发光下能够产生647nm的最大发射光，这一特性使其常用于多色荧光显微镜或流式细胞实验中。

7-AAD和碘化丙啶(PI)类似，是一种非细胞膜渗透性的荧光染料，不能穿过具有生物活性的细胞质膜，因此被用来区分正常细胞与坏死细胞，也可以被用于细胞固定或通透后的核酸染色。与碘化丙啶(PI)不同的是，被546nm的氩离子激光激发后，7-AAD的发射光谱较PI窄，且发射波长更长，对其它检测通道的干扰更小，在多色荧光分析中是PI的最佳替代品，可与多种488激发光激发的荧光染料联合使用，如FITC (异硫氰酸荧光素)、PE (藻红蛋白)、APC (别藻蓝蛋白)、Calcein AM等，在光谱的600nm左右有较弱的荧光，可用一般的荧光显微镜检测红色荧光，而在远红光650nm左右有较强的荧光，可用流式细胞仪FL3通道或配备650nm长通滤光片的荧光显微镜检测远红外荧光。

7-AAD的分子式为C62H87N13O16，分子质量为1270.45，CAS number为7240-37-1。插入DNA后的最大激发光波长为546nm，最大发射光波长为647nm。7-AAD插入DNA后的激发光与发射光光谱参考图1。

图1.7-AAD和DNA复合物的激发光谱与发射光谱。

本试剂盒内提供检测缓冲液，可以简单便捷地进行细胞坏死检测，同时又能维持正常细胞的状态。使用本产品联合Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡与坏死的效果参考图2。使用本产品联合Calcein AM细胞活性检测试剂盒检测细胞活力与坏死的效果参考图3。

图2.7-AAD细胞活力检测试剂盒联合使用Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒(C1062)检测THP-1 (人急性单核白血病细胞) (C6960)凋亡与坏死的效果图。THP-1细胞经Doxorubicin (SC0159)处理5h后的形态见图A；凋亡和坏死细胞的细胞膜被Annexin V-FITC染色成绿色荧光(图B)，坏死细胞的细胞核被7-AAD染色成红色荧光(图C)。实际检测效果会因实验条件、检测仪器的不同而存在差异，本图仅供参考。

图3. 7-AAD细胞活力检测试剂盒联合使用Calcein AM细胞活性检测试剂盒(C2013)检测HT-29 (人结肠癌细胞) (C6410)活力与坏死的效果图。HT-29细胞经TSZ (C1058)处理4h后的形态见图A；正常细胞被Calcein AM染色成绿色荧光(图B)，坏死细胞的细胞核被7-AAD染色成红色荧光(图C)。实际检测效果会因实验条件、检测仪器的不同而存在差异，本图仅供参考。

对于96孔板，按1:20配制7-AAD检测工作液，且每孔使用100μl 7-AAD检测工作液，此时本试剂盒C1053S可进行200次检测，C1053M可进行1000次检测。

-20℃保存，至少一年有效。C1053-1 7-AAD (20X)需要避光保存。

如果有细菌或真菌污染，可能会严重影响检测效果。

染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致坏死细胞的数量增加。

细胞经固定、通透和RNase处理后也可以使用7-AAD检测细胞周期，但更常用的是碘化丙啶(PI)。

荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。

本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。