§偶联：第二个碱基与第一个碱基发生偶联反应。

§封闭：将没有反应的第一个碱基的5’-OH加帽封死 (Capping)，使其不再进一步参与反应。

§氧化：将核苷亚磷酸酯氧化成更稳定的核苷磷酸酯（即将三价磷氧化成五价磷）。

重复进行一至五的步骤，直至合成完所需的引物 DNA序列。合成结束后，将引物分子从CPG上切下，再进行进一步的纯化。

纯化 | 量体裁衣做选择

DSL（脱盐）纯化，PAGE纯化，HPLC纯化是目前常会用到的几种纯化方式。建议您根据自己合成引物的长度和后续实验的需要做出合适的选择。

脱盐(DSL)：又称为简易反相柱，氨盐可以被有机溶液洗脱，但不会被水洗脱，能有效的去除盐分，纯度可满足大多分子生物学实验需求。

优点：速度快，价格优，通量大。

缺点：该方法不能有效去除比目的片段略短的引物小片段。

高效液相(HPLC)：采用高效液相色谱的原理，对引物DNA进行纯化是一种非常有效的纯化方式，能达到很高的纯度和灵敏度。纯化后，引物的纯度可大于90% 。特别适合用于短链（小于40 mer）引物和修饰引物的纯化。

优点：对纯化短链引物(＜40 mer)特别有效。

缺点：成本高，批量生产效率不高。

PAGE纯化：PAGE纯化法是使用变性聚丙烯酰胺凝胶电泳，对DNA片段进行分离，然后从凝胶中回收目的DNA的方法。

tPAGE纯化和hPAGE纯化是金唯智针对原PAGE纯化技术进行升级后推出的两种引物纯化方式，可以应用于不同长度类型的引物，纯化效果优于PAGE纯化级别。

关于金唯智

金唯智是专注于基因组研究和基因技术应用的生物技术公司，提供基因合成、Sanger测序、引物合成、分子生物学服务、基因组服务、高通量测序及GLP标准规范服务，立足于生命科学领域，已成为全球诸多知名跨国公司以及著名高等学府的战略合作伙伴和首选供应商！

引物合成：https://www.genewiz.com.cn/Public/Services/Oligo返回搜狐，查看更多