Actin

您所在的位置:网站首页 F-actin染色前应选择哪种固定液 Actin

Actin

2024-07-10 13:01| 来源: 网络整理| 查看: 265

Actin-Tracker Red-Rhodamine是一种Actin红色荧光探针,可以用于培养细胞或组织切片的Actin特异性荧光染色。

Actin-Tracker Red-Rhodamine探针为荧光染料Rhodamine标记的鬼笔环肽(phalloidin, 又称鬼笔毒素或毒蕈肽),即罗丹明标记的鬼笔环肽(phalloidin-Rhodamine),最大激发波长为540nm,最大发射波长为565nm。Actin-Tracker Red-Rhodamine 的荧光光谱和Cy3比较接近,可以用Cy3的检测条件进行检测。

鬼笔环肽是从担子类真菌死亡帽蘑菇(death cap mushroom)鬼笔鹅膏(Amanita phalloides)中分离出来的一种多肽,可特异性与真核生物的丝状的肌动蛋白(filamentous actin, F-actin)结合,从而阻止肌动蛋白解聚。微丝(microfilaments)是由肌动蛋白分子螺旋状聚合成的纤丝,所以鬼笔环肽最终可以破坏细胞内微丝的聚合-解聚动态平衡,而对细胞产生毒性。利用鬼笔环肽具有使微丝保持稳定这一生物学特点,使用荧光染料标记的鬼笔环肽可以非常方便的显示细胞内微丝的形态和分布,从而使微丝荧光探针广泛应用于生物、医学研究。

罗丹明标记的肌动蛋白发出具有独一无二的高亮度和光稳定性的红色荧光。罗丹明标记的鬼笔环肽极少会非特异性染色,可使肌动蛋白染色效果高对比度显示,也是文献中最常提及的荧光鬼笔环肽偶联物。

本微丝荧光探针有以下特点。用量少:本探针可在纳摩尔水平染色F-actin;不区分种属:不同于抗体,鬼笔环肽与F-actin的结合力在不同物种间没有显著变化,非特异性染色基本可以忽略,染色和未染色区域具有明显的辨识度;对F-actin与其它蛋白结合的影响小:本探针很小,直径大约为1.2~1.5nm,分子量小于2000Da,与F-actin结合后不影响与多种肌动蛋白结合蛋白结合,包括肌球蛋白、原肌球蛋白和后肌钙蛋白等;基本不影响F-actin的功能:本探针标记后的肌动蛋白丝仍旧保持功能,标记的肌纤维能够收缩,标记的肌球蛋白可以继续移动;亲和力一致:在各种植物细胞或动物细胞中,本探针对大、小微丝具有相似的亲和力,每个肌动蛋白可以结合一个鬼笔环肽分子,因此本探针也可用于对细胞中F-actin进行定量研究。

本产品可以用于细胞或组织内的微丝的荧光检测。使用本产品染色细胞内微丝的效果参考图1。

图1. 碧云天生产的Actin-Tracker Red-Rhodamine (微丝红色荧光探针)染色NRK-52E (大鼠肾小管上皮细胞)微丝的效果。图中可见微丝的红色细丝状形态的染色。图中的染色实验在十二孔板中进行,探针的稀释比例为1:100。本图仅作参考,不同的样品不同的检测条件,实际获得的结果可能有所差别。

本产品使用时的推荐稀释比例为1:40-200,可以配制8-40ml染色液。如果每个样品需要使用200µl染色工作液,每个包装的本产品足够用于40-200个样品的染色。

包装清单: 产品编号 产品名称 包装 C2207S Actin-Tracker Red-Rhodamine (微丝红色荧光探针) 0.2ml — 说明书 1份 保存条件:

-20℃避光保存,一年有效。

注意事项:

为避免反复冻融,建议适当分装。

对于微量的液体,每次使用前先离心数秒钟,使液体充分沉降到管底。

荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。

Phalloidin有一定毒性(LD50为2mg/kg体重),1ml Actin-Tracker Red中的phalloidin少于0.2mg,使用时请注意适当防护。

需自备盖玻片和载玻片(可以向碧云天订购)。

本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。



【本文地址】


今日新闻


推荐新闻


CopyRight 2018-2019 办公设备维修网 版权所有 豫ICP备15022753号-3