DAVID&Metascape:专注于基因功能注释和富集通路分析的网站 |
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Step2中选择"OFFICIAL_GENE_SYMBOL", Step3中选择"Gene list"。 点击提交列表,跳转界面。 点击“Gene_Ontology”进行GO分析(基因本体论),也就是对基因进行功能注释,勾选GO分析的三个参数:BP(生物学过程),CC(细胞组分),MF(分子功能)。 点击BP后面的“Chart”。 然后点击“Download File”,下载GO分析BP的数据,跳转页面。 全选后粘贴,保存在一个txt文件里面,用EXCEL打开查看如下。 同样的方法下载GO分析的CC、MF数据,保存在TXT文档里面。 例如本帖选择基因功能富集数量最多五个(数量相等情况下根据P-Value值选择)做条形图,最简单的方法是使用EXCEL来做,准备一个EXCEL表格,将GO号和count数据放在表格里面。 选中新建的列表,点击插入-图表-条形图-堆积条形图。 点击确定,保存图片,即可得到在文献中很常见的条形图。 GO的分析已完成,接着找到“Pathways”,选择KEGG_PATHWAY。 同样点击 Chart。 点击其中一条通路的Term,查看通路图。 点击“Download File”,下载KEGG分析的数据,保存在TXT文档中,EXCEL打开如图。 根据富集基因数量制作一张堆积条形图。 下拉页面我们可以看到三个选项,点击中间的选项。 可以查看所有的GO和KEGG分析结果。 DAVID常用的第二个功能是基因ID转换,点击“Gene ID Conversion”。 例如本帖选择一列基因ID输入step1中。 其余步骤与前述相同。 在Option1中选择“OFFICIAL_GENE_SYMBOL”,点击提交。 跳转界面后,点击框内红色箭头。 最终,基因ID便转换为基因名称了,点击下载保存,基因转换率为100%,当然,当基因ID数量较多时候,可能转换率就达不到100%了。 宝贝评价 DAVID网站还是比较简单的,操作起来也不麻烦,但它的功能却是相当强大的,读过生信文献的小伙伴,应该不少看到DAVID的身影。但是这里吐槽一点~DAVID数据更新稍慢一点,其实也不影响我们的生信分析。 Metascape网站 今天为大家介绍的另一个强大的数据库是Metascape网站,它是如何强大的呢?第一,三步完成基因分析;第二,一次分析即可完成GO、KEGG和PPI;第三,数据更新快,覆盖广,整合了多个数据库的资源。 直奔官网去吧~(http://metascape.org/)。 界面介绍 界面介绍没有太多可说的,因为Metascape官网的界面十分简洁清晰,左侧的数据分析栏,右侧信息公告栏,右上角是网站提供的一些帮助文件和小工具(直接下拉查看吧),页面下拉,有关于Metascape的视频介绍和Metascape引用的一些杂志的信息。 数据分析 傻瓜式的三步~ Step1:输入基因,有两种方式,本地文件导入或者粘贴gene list,右侧我们可以看到Metascape支持xls/xlsx,CSV,txt三种格式。 需要提醒一下,本地输入时候别忘记勾选“Multiple Gene List”选项了哦! 例如粘贴好100个差异基因,点击Submit。 Step2:选择物种,选择H.sapiens人类,可以看到Metascape数据库中还包含了其他物种的信息。 Step3:进行分析,选择“Express Analyze”或“Custom Analyze”都可以。 点击后跳转页面。 结果解读 首先看点击“Express Analyze”后的结果界面,对于分析结果,可以输出在EXCEL表格里面;图片可以显示在PPT模板中;也可以是一个压缩的文件夹。 Figure 1 : 功能富集分析的结果图 Table 1: TOP20的聚类分析表 Figure 2: 富集网络图,左侧是根据gene ID进行的聚类,右侧是根据P-Value进行的聚类,图片下方有保存的方式。 Figure 3 : PPI聚类功能模块分析图。 再看看点击“Custom Analyze”后的结果。 ID Conversion: 这是个gene ID的转换工具,哈哈,又学习了一种GENE ID转换的方法。Metascape支持gene ID、genesymbol的输入,在数据分析过程中,可以自动转换识别。 Annotation: 选择不同的功能注释条目后,点击Apply后进行查看。 Membership: 主要是针对用户自行搜索的一个栏目,比如输入pathway后,点击Search,再点击Apply。 Enrichment: 对于富集分析的参数及cut-off值可以进行更改设置,然后点击“Enrichment Analyze”进行分析,结果和点击“Express Analyze”后的结果是一致的。 宝贝评价 Metascape数据库用起来还是不错的,做基因功能注释丝毫不差于DAVID网站,最主要的是网站更新较快,操作简单。想做功能注释的小伙伴,赶紧行动起来吧! End 排版:小丸子返回搜狐,查看更多 |
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