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请问各位高手细胞加入TRIZOL裂解后保存于－70度，可以存放多久？如果不准备马上抽提RNA，是否先冻存细胞抽提之前再加TRIZOL比较合适还是直接加好TRIZOL后再冻存好？谢谢！回复做之前再加比较合适吧。没有加完TRIZOL再保存的道理。回复有些标本我已经加了TRIZOL，请问最多可放多久？回复加TRIZOL裂解后－70度保存，至少可以放置一个月，有条件的话，可以考虑加RNALater，更安全一些！回复那么最长可以放置多久？有些标本我已经放了半年左右，还能抽提吗？此外，还想问问TRIZOL抽提细胞总RNA至少要多少细胞？10^5左右够吗？谢谢回复我觉得加了变性剂－70℃放半年应该没有问题，一般按照每10^6细胞加入1ml的TRIZOL即可，10^5应该也可以了。我一般都是提新鲜的细胞，将细胞培养至长满培养瓶，按一大瓶细胞加入2ml TRIZOL的比例，建议你也这样做。其实你也可以将RNA提出来，分装后于－70℃冻存，同样可以保存半年～一年，只是个人经验，祝你顺利。回复昨天值班没有上网.谢谢楼上朋友的帮助,我会把已经冻存的标本试着抽提看看,以后还是及时抽提RNA较好.回复加了Trizol放-80C，基本上可以无限保存，随便你什么时候再拿出来抽提RNA。在Trizol里面RNA降解不了。 我都用过1ml溶10^8细胞。关键是homogenize之后你max spin，全部soluable，没有pellet就行了。如果有pellet，就少用一点细胞，或者多加一点Trizol。 回复我用的上海华舜公司的柱离心式RNA提取试剂盒,从培养的淋巴细胞中提RNA，也不知道试剂盒里的裂解液是不是你们说的Trizo。提了很多次，别说降解，电泳后连痕迹都没有，我也不知道该如何是好。请问，我用的是细胞培养板，24孔的，裂解液的量怎么控制啊？回复Trizol是什么，Google!!!我用的上海华舜公司的柱离心式RNA提取试剂盒,从培养的淋巴细胞中提RNA，也不知道试剂盒里的裂解液是不是你们说的Trizo。提了很多次，别说降解，电泳后连痕迹都没有，我也不知道该如何是好。请问，我用的是细胞培养板，24孔的，裂解液的量怎么控制啊？回复半年,我们有做过.回复楼上的朋友，论坛里有很多关于用TRIZOL抽提RNA的介绍，搜一下就可发现。我抽提了5个冻存超过半年的加了TRIZOL的标本，其中3个没有测出浓度，还有2个有浓度，但很奇怪把标本全部逆转录后PCR扩增B-actin，竟然全部有条带，后来我又抽了2个最近的标本，也没有测出浓度，但同样扩增出B-actin的条带，是否我的细胞量太少（大约1×10×6左右，甚至更低）所以测不出OD值，但其实有痕量的RNA存在？我看文献说逆转录一般取RNA2ug，如果测不出浓度是否会影响标本之间的可比性（接下来我准备作定量PCR）？还是只要设置好内参，就无所谓起始量？此外还想请教我想换用RNA抽提试剂盒抽提RNA以提高得率，但原先的标本已经加了TRIZOL还能用试剂盒抽提吗？请问哪个公司的试剂盒效果较好？谢谢。回复按照Trizol试剂说明书：After homogenization and before addition of chloroform, samples can be stored at -60 to -70°C for at least one month.我们的经验半年一年都行。回复最好一个月吧，我试过
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