Q1：质粒 DNA 产量低？ 

A1：

1) 质粒拷贝数低、质粒>10 kb 或革兰氏阳性菌质粒。应加大菌体使用量，洗脱液 Elution Buffer 60℃水浴预热，吸附和洗脱时间可以适当延长，以增加提取效率；

2) 菌种问题。菌种保存过程中存在质粒丢失现象，培养细菌前建议先划线活化，以稳定产量； 

3) 细菌未充分裂解。细菌须在 Buffer P1/RNase A 中充分重悬或菌体不宜过多，避免成团或过量的细菌无法裂解降低产量。

Q2：质粒 DNA 中有基因组 DNA 污染？ 

A2： 

1) 菌液培养时间太长。菌液培养时间需控制在 12~16 h； 

2) 裂解问题。加入 Buffer P2 时，必须轻柔颠倒混匀；处理多个样品时，从加入 Buffer P2 时算起， 总时间不要超过 5 min。