缓冲液配制指南 |
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Buffer 配方 1.0 mol/L Tris•HCl(pH 6.8) 溶解后,用浓盐酸调 pH 至 6.8,最后用超纯水定容至 250 mL,高温灭菌后室温下保存。 1.5 mol/L Tris•HCl(pH 8.8) 溶解后,用浓盐酸调 pH 至 8.8,最后用超纯水定容至 250mL,高温灭菌后室温下保存。 10% SDS 取 SDS 10g,加蒸馏水至 100 mL, 50 ℃ 水浴下溶解,室温保存。如在长期保存中出现沉淀,水浴溶化后,仍可使用。 10% 过硫酸胺(APS) 取过硫酸胺 0.1 g ,加超纯水1.0 mL 溶解后,4 ℃ 保存,保存时间为 1 周。(-20 ℃长期保存)
30% 丙烯酰胺 溶于总体积为 50 mL 的水中,定容至 100 mL。室温保存于棕色瓶。 10× PBS(2L) NaOH 调 pH 值至 7.4,定容至 2 L。保存于室温。 还原型 5×SDS 上样缓冲液 混匀后,分装于 1.5 mL 离心管中,4 ℃ 可保存数周,-20 ℃ 可长期保存。 电泳液缓冲液 加蒸馏水溶解定容至 1000 mL 室温保存,1 次溶液可重复使用 3~5 次。 转移缓冲液 1X 电转液: 加蒸馏水溶解定容至 1000 mL 溶解后 4 ℃ 保存,1 次溶液可重复使用 3~5 次。 TBS 缓冲液 加蒸馏水溶解,冰醋酸调 pH 至 7.2,定容至 1000 mL。室温保存。
洗脱液 TBST 溶液 TBS 溶液 1000 mL ,1 mL 吐温 20,混匀后即可使用,最好现用现配。
封闭液(含 5% 脱脂奶粉的 TBST 缓冲液) 溶解后使用,一次性使用。 RIPA(中)裂解液 Tris-base、NaCl、EDTA、SDS 称量后用蒸馏水溶解,浓 HCl 调 pH 值至 7.4,先配置 10% 脱氧胆酸钠,加入 5 mL 即为0.5%,,再加入1 mL 的 NP-40,混匀后定容至 100 mL,分装,-20℃ 保存。
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