磷酸盐缓冲液(PBS)配制指南

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磷酸盐缓冲液(PBS)配制指南

2024-07-12 00:57| 来源: 网络整理| 查看: 265

以配制1L  10×PBS储存液为例:

1、  用双蒸水清洗量筒、烧杯、10×PBS储存液玻璃瓶(3次)。

2、  使用一次性称量船,分别用分析天平称取Na2HPO4.12H2O,35.814g;KH2PO4,2.4496g;NaCl,80.0669g;KCl,2.0129g。

3、  将药品粉末倒入PBS配制专用烧杯中,加入800-900ml miniQ水,使用磁力搅拌器充分溶解(无任何固体)。

4、  用移液枪吸取2-3ul溶液滴在pH试纸上测试酸度,pH应为6.8。

5、  将溶液转移到PBS专用量筒或容量瓶中定容到1L(加miniQ水至1L),倒回烧杯中充分混合。

6、  将滤器与微型台式真空泵相连,打开微型台式真空泵后,将PBS分批倒入滤器进行过滤。滤器价格昂贵,建议一次过滤4-5L溶液。

7、  滤好的10XPBS可立刻稀释使用;稀释后可用pH试纸再次确认pH值。

8、  暂时不用的10XPBS分装至10×PBS储存液玻璃瓶中(液面不超过瓶身的3/4高度),高压灭菌。 注意事项:瓶盖不能完全拧紧(保留约半圈),用锡箔纸包裹瓶盖;不能放到底层篮子,容易被脏水污染;降温后一旦打开灭菌锅,必须立刻拧紧盖子,防止外界细菌进入。

9、  灭菌后的10XPBS可保存在室温或4℃冰箱中。每次分装后需盖紧瓶盖,降低污染概率。

10、取用前注意观察瓶底有无沉淀,摇晃后有无悬浮物;若有说明有微生物滋生,请勿使用,需重新配置。

11、每配500ml1XPBS可用50ml进口管测量50ml 10XPBS,加入450ml miniQ水,颠倒混匀。

 



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